כדי להתחיל, הפשיר את מלאי RCAS(A)retrovirus על קרח. כדי למנוע סתימת המיקרופיפטה, צנטריפוגה את התמיסה ב 10, 000 G במשך 10 שניות בארבע מעלות צלזיוס ולהעביר את supernatant לתוך צינור חדש תוך שמירה על התמיסות על קרח. מניחים פרפילם מעבדה מתוח על צלחת תרבית תאים בגודל 35 על 10 מילימטר ומוסיפים מיקרוליטר אחד של PBS סטרילי לפרפילם.
חברו מיקרופיפטה מוכנה מזכוכית למזרק פיקו אוטומטי. לחץ על מצב המילוי כדי למלא את PBS לתוך micropipette ולאחר מכן לחץ על מצב הזרקה כדי לבדוק את המוקצה מיקרוליטר אחד של נוזל. הניחו חתיכה שנייה של פרפילם מעבדה מתוח על צלחת תרבית תאים חדשה והוסיפו מיקרוליטר אחד של ציר ויראלי מוכתם בירוק מהיר לסרט.
הורידו את קצה המיקרופיפטה למאגר הנגיפי, ולחצו על מצב המילוי כדי למלא את המיקרופיפטה במיקרוליטר אחד של מלאי נגיפי. תחת מיקרוסקופ מנתח, מורידים את המיקרופיפטה המלאה המחוברת למזרק אוטומטי לאזור המטרה של עדשת עובר התרנגולת. לאחר מכן כוונן את מקור האור כדי לספק תצוגה ברורה של שלפוחית העדשה.
לאחר שווידאתם שהמיקרופיפטה נמצאת במיקום הנכון בתוך לומן העדשה, הזריקו חמישה עד 40 ננוליטרים של הזן הנגיפי. לאחר ההזרקה, יש להמתין 45 שניות לפני הסרת המיקרופיפטה בעדינות. לאחר מכן, בדוק את המיקרו-הזרקה המוצלחת על ידי בחינת הצבע הירוק המהיר בלומן הריק של העדשה ללא דליפה.
לאחר הבדיקה אוטמים את פתח קליפת הביצה בסקוטש טייפ ומניחים את הביצים באינקובטור סטטי לח בטמפרטורה של 37 מעלות. מחקר זה מדגים את ההערכה ההיסטולוגית של לולאות כימריות 50 ו -43 באמצעות immunofluorescence. באמצעות תיוג אנטי-פלאג, נבדלו קונקסונים אקסוגניים מאלה האנדוגניים.
המחקר גם מעריך את האינטראקציה בין תחום הלולאה התוך-תאית של קונקסון 50 לבין אקוופורין אפס.
