כדי להתחיל, הסירו את השיער מאזור הריקוד של העכבר המורדם באמצעות קרם להסרת שיער ומקמו את העכבר עם גבו למטה על פלטפורמת הניטור הפיזיולוגי. יש למרוח כמות קטנה של ג'ל מוליך על יריעת הנחושת שעל טבלת הניטור הפיזיולוגי. אבטח את העכבר להשהות על ג'ל זה כדי להקל על לכידת נתוני אלקטרוקרדיוגרמה ונשימה.
יש למרוח כמות קטנה של ג'ל שידור אולטרסאונד כדי להבטיח איכות תמונה אופטימלית. יישרו את הפלטפורמה לרוחב בזווית קטנה בין הגשושית לפלטפורמה, וקבלו מבט על הציר הארוך של הלב. לאחר מכן, אתר את קטע הלב המתאים במצב B.
הפעל את Color Doppler במסך המגע והזז מעט את הבדיקה כדי למצוא את המיקום הנכון. כעת, עבור למצב Pulse Wave על ידי לחיצה על הכפתור המתאים. מקם את קו החיווי הצהוב על העורק הכלילי במקביל לכיוון הזרימה, ולחץ על הלחצן Save Clip כדי לתעד את נתוני קו הבסיס.
הגדל את ריכוז isoflurane ל 3% ולחכות 30 שניות. ודא שמהירות הזרימה עולה בהדרגה עם הזמן. לעתים קרובות לחץ שוב על שמור קליפ כפתור כדי ללכוד את זרימת הדם במהירות הגבוהה ביותר שלה.
לאחר השלמת הדמיה אקוקרדיוגרפית, בזהירות להסיר את החיה מן הרציף. השתמש בכלי פונקציית מהירות השיא כדי למדוד את שיא המהירויות הדיאסטוליות ולהעריך את תפקוד הלב הסיסטולי באמצעות התמונות שנרכשו. חישוב CFR על ידי חלוקת מהירות הזרימה הכלילית השיא הדיאסטולי בזרימה מקסימלית במהירות הזרימה הכלילית השיא הדיאסטולי בנקודת ההתחלה.
בצע thoracotomy על החלל intercostal הרביעי כדי לחשוף את הלב. לאחר מכן, לקשור את עורק LAD באמצעות תפר משי 5-0. אמת איסכמיה בעכברים באמצעות אישור חזותי של הדמיה של שינוי צבע במורד הזרם בשריר הלב האיסכמי.
בצע חסימת עורק LAD במשך 30 דקות. לאחר מכן, שחררו את הרצועה ואשרו זילוח על ידי ניטור האדמומיות של אזור שריר הלב הדהוי למשך דקה עד שתיים. לאחר חסימה כלילית ורפרפוזיה, סגור את החזה בשכבות ותן לעכברים להתאושש במשך כחצי שעה.
מדדו את CFR שוב ב-1, 3, 5, 8, 24 ו-48 שעות לאחר הרפרפוזיה כפי שהודגם קודם לכן. לפני ניתוח הרפרפוזיה של איסכמיה, נמדד קו הבסיס של CFR ולעכברים היה ערך CFR תקין. עם זאת, לאחר הניתוח, חלה ירידה ניכרת ב- CFR לאחר שעה של רפרפוזיה.
ככל שזמן הרפרפוזיה התארך, ערכי CFR נותרו נמוכים באופן עקבי, מה שמרמז על כך שהיפופרפוזיה יכולה להימשך לפחות יומיים. לא נצפו שינויים משמעותיים בתפקוד הלב של החדר השמאלי כאשר CFR הופחת באופן משמעותי בעכברים.
