כדי להתחיל, מקם את עכבר C57 Black/6 JRj המורדם. שכבו על שולחן ניתוחים מחומם. אשר את היעדר תגובות רפלקס לצביטת בוהן.
רססו את העכבר באתנול 70% כדי למנוע מהשיער להידבק למספריים. באמצעות מספריים, לבצע חתך בטן בבסיס, לחתוך כלפי מעלה משני הצדדים לכלוב הצלעות כדי לחשוף את חלל הבטן. השתמש צמר גפן כדי להזיז את המעיים ימינה, לחשוף את הווריד הפורטלי.
בעזרת מלקחיים מעוקלים, מניחים שתי ליגטורות מתחת לווריד הפורטל וקושרים באופן רופף כל ליגטורה. לאחר מכן, הכנס קטטר 0.7 מ"מ לתוך וריד הפורטל. בעת ניקוב, מוציאים את המחט מהקטטר ומנחים את הצנתר דרך הווריד עד שקצה הצנתר קרוב לכבד.
לאחר מכן, להדק את הליגטורות. שימו לב לכבד. הגדר את קצב הזרימה ממשאבת הגלילה וחבר את צינור השפע.
ליזום את השפע של הכבד ב 37 מעלות צלזיוס. ברגע שהכבד מחוויר, השתמשו במספריים כדי לחתוך את כלוב הצלעות והסרעפת. לאחר מכן, באמצעות מלקחיים נקודתיים עדינים, מניחים את הליגטורה מתחת לווריד הנבוב התחתון העל-כבדי.
לאחר מכן, להכניס קטטר לתוך נבוב הווריד התחתון suprahepatic דרך אטריום ימין של הלב. כאשר מחורר, להסיר את המחט ולהנחות את הצנתר דרך הווריד קרוב יותר לכבד. לאחר מכן, להדק את הליגטורה.
חבר צינור לאיסוף שפכי זילוח וחבר את כל הצינורות בסרט עמיד למים. באמצעות מתאם מהדק כלי דם, הניחו מהדק כלי דם על פני הווריד הוורידי האינפרא-הפטי קאווה מיד מעל וריד הכליה הימני כדי למנוע תערובת מתה. לאחר מכן, להגדיל את קצב זרימת זילוח ל 3.5 מיליליטר לדקה.
הפעל את הטיימר ואת הקלטת הלחץ. מכסים את הכבד בוילון סטרילי טבול במי מלח, מאזנים למשך 30 דקות ומודדים את נפח הקולחים. לאחר 30 דקות של שיווי משקל, התחל את הניסוי עבור אוסף הדגימות הבסיסי הראשון באספן השברים.
נטרו את מלכודת הבועות באופן קבוע ומלאו מחדש במאגר זילוח כאשר הם קרובים לריק. אספו דגימת חיץ באמצעות סטופקוק תלת-כיווני מיד לפני שהיא נכנסת לאיבר ומצנתר האיסוף המוחדר לווריד הנבוב התחתון. באמצעות מנתח גז דם, למדוד את הדגימה שנאספה כדי לאשר כי האיבר פעיל מטבולית.
לאחר 15 דקות של זילוח בסיסי, באמצעות משאבת מזרק, התחל את הגירוי הראשון על ידי החדרת חומר בדיקה דרך סטופקוק תלת-כיווני בקצב הזרימה הרצוי. לאחר הסימולציה, אספו דגימות מקו הבסיס במשך 20 עד 30 דקות לפני תחילת הגירוי השני. הייצור של אוריאה בכבד מחורר עם תקופות בסיס קבועות שקדמו לכל אחת משתי תקופות גירוי הציע כי התגובה של אוריאה לשני גירויים רצופים עם חומצות אמינו מעורבות היא עקבית.
נצפה שחרור בסיסי יציב של גלוקוז וחומצות שומן לא אסטריות. לפני עלייה חזקה בגלוקוז ובחומצות שומן שאינן ED במהלך עירוי גלוקגון. הערך הממוצע במצב הבסיסי ובמהלך עירוי גלוקגון מצביע על כך שגלוקגון מגרה במהירות גליקוגנוליזה בכבד וליפוליזה.
עם זאת, ללא תקופות בסיס יציבות, זה הופך להיות בלתי אפשרי להבחין בין תגובת אוריאה אחת לאחרת.