בדיקות לבדיקת ריכוזים בטוחים והשפעות של DIO על תאי DAKIKI רגילים

כדי להתחיל, זרעו תאי DAKIKI בצלחות של 96 בארות בצפיפות של 0.4 מיליון תאים לכל באר. הגדר את קבוצות הניסוי השונות, ולאחר מכן, את הטיפולים המתאימים המבוססים על שיטת הקיבוץ. לדגור על הצלחות במשך 24 שעות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס ו-5% פחמן דו חמצני.

לבדיקת ציטוטוקסיות לקטט דהידרוגנאז, הוסף חמישה מיקרוליטרים של ליזט לכל באר בקבוצת הביקורת הגבוהה. ולדגור על הצלחת ב 5% פחמן דו חמצני ו 37 מעלות צלזיוס במשך 15 דקות. לאחר מכן, מוסיפים 100 מיקרוליטר של תערובת התגובה לכל באר.

כדי להרוות את התגובה, להוסיף 50 מיקרוליטר של פתרון תגובת עצירה לכל באר. עבור ערכת ספירת תאים-8, או CCK-8, לאחר הדגירה הראשונית של 24 שעות, להוסיף 20 מיקרוליטר של מגיב CCK-8 לכל באר. ומחזירים את הצלחות לאינקובטור ב-5% פחמן דו-חמצני ו-37 מעלות צלזיוס למשך שעתיים.

התוצאות של בדיקת ציטוטוקסיות לקטט דהידרוגנאז הראו ציטוטוקסיות לא משמעותית המושרה על ידי דיוסין בריכוזים של 0.25 עד 1.0 מיקרוגרם למיליליטר, אשר שיעורי שחרור לקטט דהידרוגנאז מתחת ל -10% בדיקת CCK-8 הראו כי בהשוואה לקבוצת המודל, דיוסין עיכב התפשטות תאי DAKIKI המושרה על ידי LPS באופן תלוי ריכוז, עם ריכוזים של 0.5 ו -1.0 מיקרוגרם למיליליטר הראו עיכוב משמעותי.