כדי להתחיל, בחר מדיום גידול נמטודה או צלחת NGM תפוס על ידי זחלי שלב L1 מורעבים Caenorhabditis elegans. בעזרת מיליליטר אחד של מים סטריליים, לשטוף את התולעים מהצלחת בעדינות. Aliquot כ 300 מיקרוליטר של אוכלוסיית התולעים על לוחות NGM זרע עם OP50 מרוכז.
הניחו לצלחות להתייבש באמצעות מייבש צלחות או מבער בונזן, ולאחר מכן דגרו בחום של 20 מעלות צלזיוס עד שאוכלוסייה משמעותית הופכת למבוגרים בעלי גרביד. כדי לאסוף את התולעים, לשטוף אותם מהצלחת עם עד 10 מיליליטר של מים סטריליים ולהעביר תערובת מים חמים לתוך צינור חרוטי 15 מיליליטר. אפשרו לתולעים לשקוע על ידי כוח הכבידה בתחתית הצינור למשך כארבע דקות.
בעזרת קצה פיפטה קטן, שואפים בזהירות ומשליכים את הסופרנטנט. לאחר מכן מוסיפים עד 15 מיליליטר מים סטריליים. לאחר השטיפה הסופית, להסיר את supernatant ולהוסיף חמישה מיליליטר של פתרון מוכן טרי של אקונומיקה הידרוקסיד נתרן.
לדגור על התולעים במשך חמש דקות בטמפרטורת החדר תוך ערבול כל דקה במשך 10 שניות לפחות. עקוב אחר ההתקדמות באמצעות מיקרוסקופ מנתח. לאחר שכל המבוגרים נפתחים או מתמוססים, הוסיפו חיץ M9 כדי לנטרל את התגובה, והביאו את הנפח הסופי ל-15 מיליליטר.
לאחר מכן צנטריפוגה את הצינור במשך שתי דקות ב 1, 300 G.לשטוף את הביצים פעמיים נוספות עם 13 מיליליטר של חיץ M9 באמצעות צנטריפוגה ואחריו שטיפה אחת עם 15 מיליליטר של חיץ מלא S. לאחר מכן צנטריפוגות את הביצים במשך שתי דקות ב 1, 300 G.לאחר צנטריפוגה, לשאוף את supernatant ולהוסיף 10 מיליליטר של חיץ מלא S. סובבו את הצינורית בעדינות בטמפרטורת החדר למשך הלילה באמצעות מוטטור או מכשיר דומה.
באמצעות מיקרוסקופ ניתוח, להעריך אם התולעים בקעו. ספרו את התולעים בטיפות של 10 מיקרוליטר של חיץ S מתחת למיקרוסקופ. הכינו תערובת תולעים נוזלית עם 60 תולעים למיליליטר בתווך S שלם המכיל קרבנצילין, אמפוטריצין B ו-OP50.
הוסף 120 מיקרוליטר של בינוני עם תולעים לשורות A עד G וללא תולעים בינוניות לשורה H.ואז לאטום את הצלחת עם סרט אוטם כדי למנוע זיהום ואידוי. דוגרים על הצלחות האטומות במשך כ-65 שעות בטמפרטורה של 20 מעלות צלזיוס עד שהחיות הופכות לתולעי L4. הוסף 30 מיקרוליטר של תמיסת מלאי פלואורודאוקסיורידין 0.6 מילימולרית לכל באר כדי לעקר את בעלי החיים בשלב L4.
אטמו מחדש את הצלחת באמצעות אטמי סרטים והסעירו אותה למשך 20 דקות ב-800 סל"ד על שייקר פלטת מיקרוטייטר. מחזירים את הצלחות לאינקובטור של 20 מעלות צלזיוס. למחרת, הוסף את הסם המעניין לתרבות היום הראשון.
אטמו מחדש את הצלחות עם סרט איטום ונערו במשך 20 דקות במהירות 800 סל"ד על שייקר צלחת. לאחר מכן, לאחר הסרת המכסה והאטם, מדדו את OD600 בקורא לוחות עבור המדידה של היום הראשון. סוגרים מחדש ומחזירים את הצלחות לאינקובטור של 20 מעלות צלזיוס.
באמצעות מיקרוסקופ הפוך, רצוי עם מטרה כפולה, לספור את אוכלוסיית התולעים בכל באר ולרשום את המספרים בגיליון אלקטרוני. לאחר הספירה, מחזירים את הצלחות לאינקובטור של 20 מעלות צלזיוס. עקומת התגובה למינון של שינוי מלא בצריכת המזון כפונקציה של ריכוז הסרוטונין הראתה כי זן N2 יכול לאכול יתר על המידה באופן תלוי מינון.
מוטנט daf-16 mu86 מציג הזנה בסיסית גבוהה יותר מאשר N2. עם זאת, הוא אינו יכול להגיב לסרוטונין באותו אופן תלוי מינון כמו זן N2. הבדל משמעותי נצפה בצריכת המזון של תולעים שטופלו בלוקספין אך ניזונו מחיידקים שהומתו על ידי קרני רנטגן, קרני גמא או פרפורמלדהיד. השוואת צריכת המזון של סדרה של זנים גנטיים הראתה כי מוטנטים exc-4 ו- cgr-1 אוכלים פחות בעוד מוטציות srp-6 אוכלים יותר.
