JoVE Journal

Neuroscience

A subscription to JoVE is required to view this content.

בדיקת הרגלת חוש הריח כדי לקבל תובנות גנטיות והתנהגותיות על הפרעת הספקטרום האוטיסטי באמצעות מודלים של דרוזופילה

Transcript

כדי להתחיל, להשיג את הזבובים מוכנים לבדיקת הרגלה. מניחים מיליליטר אחד של הריח המועדף מהול באור נוזלי פרפין בצינור מיקרופוגה של 1.5 מיליליטר. מערבבים את הצינור במשך 10 דקות ומכסים אותו בניילון נצמד מחורר באופן שווה.

בעזרת חוט, תלו את צינורות הריח בבקבוקי מדיה נפרדים המכילים זבובים. מכסים היטב את הבקבוק בצמר גפן ועוטפים אותו בנייר מלאכה כדי למנוע מיזוג של הריח והאדים. תייגו את בקבוקי הבקרה והריח כנאיביים וחשופים לריח בהתאמה.

שמרו את בקבוקי האינדוקציה הללו במשך שלושה ימים באינקובטור. עבור מבחן מבוך Y, חבר את מבוך Y למתאם, קבע את תחתית מבוך Y לבקבוקון הכניסה, ולאחר מכן חבר לתאי טיפוס לשתי הזרועות של מבוך Y. בעזרת צינורות סיליקון נטולי ריח, חברו את הקצה המתחדד של כל תא טיפוס לבקבוק הריאגנט המכיל את הריח.

בעזרת משאבת הוואקום, הסיעו את הריח מבקבוקי הגז לשתי זרועות ה-Y והניחו לו להרוות במשך 15 דקות. הכניסו בעדינות את זבובי הכוכבים של כל בקבוקון לבקבוקון הכניסה של מערך מבוך Y. לאחר התאקלמות קצרה, חבר את בקבוקון הכניסה עם מתאם מבוך Y כדי להתחיל בבדיקה.

תנו לזבובים לטפס על זרועות מבוך ה-Y ולהילכד בשני תאי האיסוף למשך יותר מדקה. בסיום, הקש בחזרה על הזבובים לתחתית בקבוקון הכניסה והחלף את מיקום הזרועות של מבוך Y כדי למנוע הטיית צד. רשום את מספר הזבובים המטפסים על כל אחת משתי הזרועות של מבוך Y בתוך משך הזמן.

זבובי השורה לא התרגלו לאחר חשיפה של שלושה ימים לריח בהשוואה לזבובי הבר.

Explore More Videos

We use cookies to enhance your experience on our website.

By continuing to use our website or clicking “Continue”, you are agreeing to accept our cookies.

Learn More