כדי להתחיל, להשיג פלזמה עשירה טסיות על ידי צנטריפוגה ציטראט נוגדי קרישה דם שלם ב 200g במשך 20 דקות. הוסיפו אינדומתצין ו-PGE1 לפלזמה ולצנטריפוגה במשקל 500 גרם למשך 10 דקות. השהה מחדש את גלולת הטסיות המתקבלת בחיץ HEPES של Tyrode שונה ב 37 מעלות צלזיוס כדי לקבל צפיפות של 2x10^8 טסיות למיליליטר.
הניחו את טסיות הדם במשך 30 דקות ב 37 מעלות צלזיוס. הוסף את DETC לריכוז סופי של חמישה מיקרומולרים ודפרוקסמין לריכוז סופי של 25 מיקרומולר לתרחיף טסיות, ואחריו CMH לריכוז סופי של 200 מיקרומולרית. מניחים את הדגימות בקובטות צבירה המצוידות במגנטים ערבובים מצופים טפלון, ומעמיסים אותן על אגרגומטר.
לאחר דקה, להוסיף גירויים כגון טרומבין או קולגן, לדגור במשך 10 דקות. לאחר הדגירה, להעביר את מתלה טסיות מ cuvette צבירה צינור מיקרו צנטריפוגה במהירות להסתובב למטה ב 6, 000g במשך 10 שניות. יש להעמיס 50 מיקרוליטר של הסופרנאטנט במיקרופיפטות נימיות ולאטום בשעוות איטום EPR.
העבר דוגמאות לסורק EPR והגדר את הפרמטרים בסורק. הערך חמצון CMH לרדיקל CM כאזור מתחת לעקומה של פסגות EPR מתועדות. השג עקומת כיול באמצעות רדיקל CM זמין מסחרית.
עוצמת אות ה-EPR בדגימות הייתה פרופורציונלית לעוצמת שיאי ה-EPR. הספציפיות של הזיהוי אושרה עם נבלות ROS ומעכבים סלקטיביים של אנזימים המייצרים אניון סופראוקסיד. נתונים על גירוי טסיות דם עם טרומבין או קולגן בנוכחות מעכב סלקטיבי VAS2870 הציעו כי NADPH oxidases הם המקור העיקרי של אניונים סופראוקסיד טסיות בתגובה לשני אגוניסטים אלה.
