כדי להתחיל, הניחו את כלי הניתוח האוטומטיים על שולחן הניתוחים. לגלח את בטנה של החולדה המורדמת ולהניח את החולדה במצב שכיבה על לוח הניתוחים. נקו את הבטן עם יוד פובידון ואחריו אתנול 70%.
יש להניח משחה אופתלמית מתחת לעיני החולדה כדי למנוע יובש. אבטחו את החולדה במקומה על לוח הניתוחים. הפעל את תוכנת רכישת הנתונים והתחל להקליט.
הפעל את מכונת ההנשמה בארבעה מיליליטר לקילוגרם וודא שלחץ התפוגה הסופי החיובי הוא סביב שני סנטימטרים של מים. באמצעות מספריים, לבצע laparotomy קו האמצע מתהליך xiphoid לסימפיזת הערווה. לאחר מכן, בעזרת מכשיר קהה, לבצע סיבוב הקרביים המדיאלי-צדדי ולדמיין את הווריד הנבוב התחתון infrahepatic.
הזריקו הפרין לווריד הנבוב התחתון בעזרת מחט של 20 מד. בעזרת זוג מספריים, חותכים את העור מהחריץ החזה ממש מתחת לזווית הלסת התחתונה ומתחילים לנתח לכיוון קנה הנשימה. לאחר מכן, נתחו בבוטות את שרירי הרצועה הדרושים כדי לחשוף את קנה הנשימה.
בצע חתך רוחבי בקנה הנשימה הקדמי בין טבעות הסחוס, להבטיח לא לחתוך דרך החלק האחורי של קנה הנשימה. מניחים תפר משי 5-0 סביב קנה הנשימה. הכנס את הצינור האנדוטרכאלי לטבעות הסחוס, וחבר אותו באמצעות תפר משי 5-0.
חבר את הצינור האנדוטרכאלי למכונת ההנשמה וודא התרוממות חזה תקינה. באמצעות מספריים, לבצע sternotomy החציון ולהיכנס לחלל החזה. מקם את קיר החזה כדי לחשוף את הלב והריאות, הימנעות כל מניפולציה בשוגג של הריאות.
בשילוב של דיסקציה חדה ובוטה, הסר את בלוטת התימוס מהמדיאסטינום הקדמי. זהה את עורק הריאה והנח סביבו תפר משי 5-0 כדי להתכונן לקנולציה. בצע חתך של שניים עד שלושה מילימטר בדרכי יציאת החדר הימני באמצעות מספריים כדי למקם את צינורית העורקים בתוך עורק הריאה ולאבטח אותה עם תפר 5-0.
לאחר המתת החולדה, חברו במהירות את נוזל שימור הריאות ששוחרר מהאוויר לצינורית העורקית כדי שכוח הכבידה ישטוף את הריאות. חבר את צינורית העורקים למעגל EVLP. הפעל את משאבת הרולר ואפשר לכמות קטנה של פרפוזט לזרום דרך הריאה והחוצה מהחדר השמאלי לתוך חלל בית החזה.
ברגע שהפרבוסט מתחיל לזרום מהאטריום השמאלי, כבו את משאבת הגלילה. לאחר מכן, מניחים מלקחיים קטנים בחדר השמאלי ומתחו בעדינות את טבעת המסתם המיטרלי. מניחים עניבת משי 5-0 סביב הלב וקשירה רופפת.
מכניסים את צינורית האטריום השמאלית לחדר השמאלי ומקדמים את הצינורית עד שניתן לראות אותה בתוך האטריום. אבטחו את האטריום השמאלי עם תפר 5-0 שנקבע מראש. זהה את הוושט ומהדק אותו עם hemostat קרוב ככל האפשר לסרעפת.
לאחר מכן, לחתוך את הוושט מתחת hemostat. בעזרת עמוד השדרה כמדריך, חותכים את כל חיבורי הרצועות המחברים את גוש הלב-ריאה למבנים הסובבים אותו בעזרת מספריים. לאחר מכן לנתח את קנה הנשימה מן הצוואר לחתוך את קנה הנשימה מעל צינור endotracheal כדי לשחרר את בלוק לב-ריאה.
העבר את בלוק הלב-ריאה למעיל החזה בתוך מעגל EVLP וחבר את צינורית האטריום השמאלית למעגל. הפעל את משאבת הגלילה וחבר את צג ההנשמה. בדוק את מלכודת הבועות כדי לוודא שלא מוכנסים אמבולי אוויר למערכת.
שנו באיטיות את הגדרות האוורור והזילוח לרמות הניסוי הרצויות במהלך 15 הדקות הראשונות. בנוסף, מגבירים את קצב זרימת הזילוח לקצב וללחץ הרצויים. בנקודות זמן ייעודיות יש לבדוק את רמות גזי הפרבוסט ואת בדיקות תפקודי הריאות.
כל הפרפוזטים שנבדקו הראו ירידה קלה בלחץ החלקי של חמצן באטריום השמאלי, כאשר הפרפוזט מבוסס RBC ירד משמעותית בשעה אחת. במשך השעות הבאות, הן polyhHB והן פרפוזטים בקרה היו יציבים באטריום השמאלי לחץ חלקי של חמצן. לחץ הדלתא החלקי של חמצן ירד משמעותית בשעה אחת בקבוצת פרפוזט RBC בעוד שהוא נשאר יציב בפוליHB ובקרת פרפוזטים עם מגמה לא מובהקת.
הלחץ החלקי של פחמן דו חמצני באטריום השמאלי היה נמוך משמעותית ב- RBC וב- perfusate הבקרה בהשוואה ל- polyhHB לאחר השעה הראשונה, ומגמה זו נמשכת בשעות שלאחר מכן. לחץ הדלתא החלקי של פחמן דו חמצני עלה באופן משמעותי בפרפוזט RBC לאחר שעה ולאחר מכן נשאר יציב הן בפוליHB והן בפרפוזט הביקורת. נתונים פיזיולוגיים של הריאות בזמן אמת מראים כי RBC perfusate הגביר באופן משמעותי את תנגודת כלי הדם הריאתיים בתוך השעה הראשונה.
בעוד שגם פוליHB וגם פרפוזט הביקורת שמרו על תנגודת כלי דם ריאתית נמוכה ויציבה לאורך התקופה, השינוי במשקל הריאות היה משמעותי בפרפוזט RBC בתחילה, עם עלייה מתמשכת בכל הפרפוזטים, מעט יותר ב- polyhHB. התאימות ירדה באופן משמעותי בפרפוזאט RBC בשעה הראשונה, בעוד שהיא ירדה באופן לא משמעותי בפרפוזטים אחרים. PolyhHB היה בעל התאימות הגבוהה ביותר לאחר ארבע שעות.
