כדי להתחיל, מקם את העכבר הנשי הניסיוני על פלטפורמת עבודה. תוך צפקית, לנהל 7.5 יחידות בינלאומיות של גונדוטרופין בסרום סוסה בהריון בסביבות השעה 20:00 ביום הראשון. לאחר 48 שעות, תוך צפק להזריק 7.5 יחידות בינלאומיות של גונדוטרופין כוריוני אנושי.
מחלקים מכסה צלחת תרבית תאים לחצאים עליונים ותחתונים. במחצית העליונה, הניחו ארבע עד שש טיפות של חמישה מיקרוליטר כל אחת של PVP למיקום זרע. הוסף 8 עד 10 טיפות של חמישה מיקרוליטר כל אחד של M2 בינוני במחצית התחתונה עבור הליך ICSI.
כסו את הטיפות הבינוניות PVP ו-M2 בכשלושה מיליליטר שמן מינרלי. לאחר בידוד קאודה אפידידימלית מן העכבר זכר המתת חסד, בעדינות לכתם אותו על גזה מעוקר. פתח את אפידידימיס קאודה וסחט בעדינות, באמצעות מלקחיים כדי לשחרר את הזרע, לאסוף אותם צינורות נוזל צינור אנושי מאוזן מראש.
שוטפים את הקאודה אפידידימיס בנוזל הצינוריות האנושי שחומם מראש. הניחו את הצינור חשוף בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס ואינקובטור של 5% פחמן דו חמצני לקיבול זרע. ביום הרביעי לאחר הזרקת גונדוטרופין כוריוני אנושי, הניחו את נקבת העכבר המתת חסד מתחת למיקרוסקופ מנתח.
באמצעות מחט של 25 מד, לקרוע את האמפולה של oviduct כדי לשחרר קומפלקסים רבים של ביציות קומולוס. לאחר הקיבול, סוניק 100 מיקרוליטר של הזרע במשך חמש שניות כדי להפריד את הראשים מהזנבות. מלא את מחט micromanipulation עם נוזל ההפעלה, להבטיח את החלק מלא מודד 0.5 ס"מ בתוך המחט.
התקן את המחט על זרועו הימנית של המיקרומניפולטור ואבטח אותו על ידי הידוק מכסה האחיזה. לאחר מכן להתקין micromanipulation שטוח מחזיק פיפטה על הזרוע השמאלית של micromanipulator. מקמו את מחט ההזרקה ואת פיפטת האחיזה בשדה הראייה של המיקרוסקופ.
תחת מיקרוסקופ קיטוב, לקבוע את המיקום של ציר metaphase בתוך הביצית כדי להבטיח כי מנגנון הציר אינו בצד ההזרקה. במגע של מחט ההזרקה עם הזונה פלוסידה, הפעילו פעימות פייזו בעוצמה של חמש ובתדירות של אחת, תוך יצירת נקב בזונה פלוצ'ידה ומאפשרים למחט ההזרקה לעבור. באמצעות פעימות פייזו בעוצמה אחת ובתדר אחד, יוצרים נקבובית קטנה בקרום הפלזמה, ומבטיחים שראש הזרע מוזרק לתוך הביצית.
באמצעות מלקחיים א-טראומטיים, הוציאו בזהירות את השחלות, הביציות והרחם מעכברה מדומה בהריון. בצע חתך קטן כלפי מעלה בזווית באמצעות קצה מחט מזרק על דופן הרחם מתחת לצומת הרחם, הימנעות כלי דם. הכנס בעדינות את האובידוקט שניים עד שלושה מילימטרים דרך החור הקטן.
באמצעות שיטת ICSI הושג שיעור הפריה של 89.57% בעכברים, כאשר 87.38% מהזיגוטות התקדמו לשלב העובר בן 2 התאים תוך 24 שעות לאחר ICSI. שיעור הלידה של גורים חיים לאחר החזרת עוברים נצפה ב -42.5% לא הייתה תנודה משמעותית ברמות הגלוקוז בדם אקראיות בין עכברים שנולדו באופן טבעי לעכברי ICSI. עם זאת, עכברי ICSI זכרים הציגו באופן עקבי רמות גלוקוז גבוהות בדם בצום, דבר המצביע על הומאוסטזיס גלוקוז לקוי.
במבחני סבילות לגלוקוז נצפו הבדלים משמעותיים ברמות הגלוקוז בדם בין ICSI זכר לעכברי ביקורת, בעוד שלא נצפה הבדל בעכברות נקבות. במעקב אחר משקל גוף, עכברי ICSI זכרים ונקבות כאחד הציגו פנוטיפ של עודף משקל בהשוואה לקבוצת הביקורת.
