לאחר גידול תאי אנדותל בצלחת באר 96, להסיר אותו מן האינקובטור ולאשר מפגש באמצעות מיקרוסקופ הפוך. הכניסו את הצלחת לכיור כדי להסיר את המדיה השלמה, והכתימו את החלק העליון של הצלחת במגבת נייר. הוסף חיץ בדיקת HBSS HEPES בתוספת פתרון probenecid למאגר ממס פיפטה רב ערוצי של 50 מיליליטר.
באמצעות פיפטה רב ערוצית, להוסיף 100 מיקרוליטר של חיץ הבדיקה לכל באר ולאפשר לתאים לשבת במשך חמש דקות. לאחר מכן, החלק את הצלחת כדי להסיר את מאגר הבדיקה. הוסף מאגר הורדה למאגר ממס פיפטה רב-ערוצי נפרד של 50 מיליליטר.
באמצעות פיפטה רב ערוצית, להוסיף 50 מיקרוליטר של חיץ טעינת צבע לכל באר של צלחת הבדיקה. דוגרים על הצלחת בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס ופחמן דו חמצני של 5% למשך 45 דקות. לאחר הדגירה, התבוננו בצלחת תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי כדי לאשר את ספיגת הצבע.
החלק את הצלחת כדי להסיר את תמיסת הצבע. שטפו את התאים פעמיים עם 50 מיקרוליטר של מאגר בדיקת HBSS HEPES בתוספת תמיסה מועילה בכל באר. החלק את הצלחת כדי להסיר את מאגר הבדיקה.
הוסיפו 92 מיקרוליטר של חיץ בדיקת HBSS HEPES לכל באר, ושוב, צפו בתאים במיקרוסקופ פלואורסצנטי כדי להבטיח שעודפי הצבע הוסרו במלואם ושהתאים יישארו דבוקים. באמצעות פיפטה רב ערוצית, להוסיף שני מיקרוליטרים של פתרונות אנטגוניסט ורכב לבארות המתאימות. לאחר הפעלת קורא הצלחות, כוונו את הטמפרטורה ל -37 מעלות צלזיוס ודגרו על הצלחת למשך 15 דקות.
מדוד את פלואורסצנטיות הרקע בעמודות אחת ושתיים, ובצע חמש סריקות לכל באר. הוציאו את הצלחת מקורא הצלחות, ואז מפס PCR של 8 צינורות, הוסיפו במהירות שישה מיקרוליטרים של תמיסת אגוניסט באמצעות פיפטה רב ערוצית לכל באר בעמודות אחת ושתיים. מדדו את השינוי בפלואורסצנטיות כאשר מתרחשת ניוד סידן בתאים.
בצע 20 סריקות של כל באר. בדיקת גיוס הסידן עם תאי אנדותל הראתה כי בארות בקרה חיוביות ללא אנטגוניסט הציגו עלייה מהירה בפלואורסצנציה. בארות עם ריכוזי אנטגוניסטים גבוהים הראו שינוי מזערי בפלואורסצנטיות, בדומה לבארות הבקרה השליליות ללא אגוניסט.
