כדי להתחיל, להשיג אורגנואידים קיבה אנושיים גדל באופן פעיל עם קטרים בין 200 ל 700 מיקרומטר. הפשירו את המטריצה החוץ תאית, או ECM, על קרח למשך 45 דקות לפחות. וחימום מראש של צלחות תרבית תאים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס באינקובטור של 5% פחמן דו חמצני.
לאחר הוצאת המדיה מהבארות של צלחת התרבית, פיפטה קרה כקרח PBS על כל טיפת ECM. ולגרד את הג'ל עם קצה פיפטה P-1000. אסוף את PBS עם קטעי ECM המכילים אורגנואידים לתוך צינור חרוטי 15 מיליליטר.
צנטריפוגה את הצינור ב 200G בארבע מעלות צלזיוס במשך חמש דקות. לאחר שאיפת הסופרנטנט, הוסיפו 350 מיקרוליטר של 0.25% טריפסין-EDTA לכל צינור וערבבו בעדינות. לדגור את הצינורות באמבט מים, מזג ב 37 מעלות צלזיוס במשך שתיים עד חמש דקות.
הוסף 600 מיקרוליטר של DMEM קר כקרח, בתוספת פניצילין וסטרפטומיצין לכל צינור, ופיפטה נמרצת למעלה ולמטה 40 פעמים. צנטריפוגה את הצינור כפי שהודגם ומשעה מחדש את לוח התאים בנוזל ECM קר כקרח. עבור כל דגימה, צלחת 40 מיקרוליטר של ECM נוזלי המכיל שברי אורגנואידים בקו דק ואופקי לאורך קוטר צלחת תחתית זכוכית 35 מ"מ.
לאחר 15 עד 30 דקות של דגירה, להוסיף בזהירות שני מיליליטר של מדיה הרחבת אורגנואיד לצלחת לאורך קצה המנה מבלי להפריע לג'ל פולימרי.
