כדי להתחיל, להכין ולמקם את החולדה מורדמת עבור אלקטרופיזיולוגיה. החל פולסי גל מונופאזיים קתרטיים מרובעים כדי לעורר את העצב הפרני להקלטת תגובות CMAP. הגדל את עוצמת הגירוי בהדרגה עד שמשרעת התגובה מפסיקה לגדול.
לאחר מכן, העלו את עוצמת הגירוי לכ-120% מהרמה הנדרשת לתגובה מקסימלית כדי להבטיח גירוי סופר מקסימלי ותיעדו תגובה נוספת. מדוד ותעד את המשרעת משיא לשיא של CMAP במיליוולטים. מתן גירוי תת-מקסימלי עם משך של 0.1 אלפיות השנייה בתדירות של 1 הרץ.
הגדל בהדרגה את העוצמה במרווחים של 0.03 מיליאמפר כדי לעורר תגובות מצטברות עד שתושג תגובה מינימלית של הכל או אף אחד. לאחר מכן, לרכוש את התגובה הראשונית עם עוצמת גירוי הנע בין 2 ל 10 מיליאמפר. לאחר שמירת התגובה המצטברת הראשונה, רכשו תוספות נוספות עם עוצמות גירוי גבוהות יותר ויותר במרווחים של 0.03 מיליאמפר.
ודא שהשיא השלילי הראשוני של התגובות המצטברות מתיישר באופן זמני עם השיא השלילי של תגובת CMAP המרבית. בהתחשב במעורבות הסרעפת בנשימה, בדוק יציבות והיעדר שבירה בכל תגובה מצטברת כדי לאשר עקביות על פני שלוש תגובות כפולות. התבונן בתגובות מצטברות בזמן אמת ושכב אותן על הקלטות קודמות לצורך הבחנה חזותית.
לאחר מכן, אשר כי משרעת תוספת הוא לפחות 25 מיקרו וולט. לאחר רישום 10 תגובות מצטברות, ודא שהמשרעת של כל תוספת אינה עולה על 1/3 מהמשרעת הכוללת של התגובה הסופית. כדי להעריך את המשרעת הממוצעת של SMUP, ממוצע הערכים של 10 דרגות.
לאחר מכן, חלק את משרעת CMAP המקסימלית באמפליטודת SMUP הממוצעת כדי לקבוע את MUNE. שבעה ימים לאחר הזרקת CTB-SAP תוך-פלאורלית, MUNE ירד ל-60 יחידות מוטוריות תפקודיות בחולדות בוגרות בהשוואה ל-74 בחולדות ביקורת. משרעת CMAP נותרה יציבה יחסית, מה שמרמז על הנבטה בטחונית כמנגנון פיצוי אפשרי.
דיאפרגמה CMAP, SMUP ו- MUNE נמדדו במשך 28 ימים לאחר ההזרקה. CMAP לא הראה שינוי ניכר. העלייה הממוצעת ב-SMUP עבור חולדות CTB-SAP הייתה כ-50% עד 60%השינויים היו משמעותיים לאורך זמן ויוחסו ל-CTB-SAP.
MUNE הופחת בכ-40% בחולדות CTB-SAP, מה שמצביע על השפעות משמעותיות של זמן בטיפול ב-CTB-SAP.