כדי להגדיר את הבדיקה הקינטית עבור פפטידים RBPR2 ו- STRA6 מדללים באופן סדרתי את העכבר RBPR2, RBPR2 מוטנטי ופפטידים STRA6 במאגר ריצה. פתח את תוכנת הבקרה ובחר באשף Kinetic SOAR Affinity. בתיבת הדו-שיח של רצף ההזרקה, בחר נתיב זרימה 2.1 עם תא זרימה 2 כפעיל ותא זרימה 1 כהפניה.
בתיבת הדו-שיח של ההגדרה, סמן את האפשרות הפעל מחזורי אתחול, הזן את הפתרון כחיץ, ציין את מספר המחזורים ולחץ על הבא. כעת עבור לדיאלוג פרמטרי ההזרקה והזן פרמטרים לדוגמה כגון זמן מגע של 120 שניות, קצב זרימה של 30 מיקרוליטר לדקה וזמן דיסוציאציה של 300 שניות. עבור פרמטרים רגנרציה, להגדיר את פתרון התחדשות חומצה הידרוכלורית גליצין עם זמן מגע של 30 שניות קצב זרימה של 30 מיקרוליטר לדקה, ולאחר מכן לחץ על הבא.
בתיבת הדו-שיח של הדגימות, הזן את שמות הפפטידים, המשקלים המולקולריים והריכוזים, ולאחר מכן לחץ על הבא. בדיאלוג מיקום המדף, הקצו את הפפטידים המדוללים כדגימות בודדות של 120 מיקרוליטר בריכוזים שונים מאחד עד 100 מיקרומולר למיקומים המיועדים על המדף. לחץ על הוצאה מדף והכנס את כל הבקבוקונים.
לאחר מכן, לחץ על הבא ולאחר מכן, בתיבת הדו-שיח הכנת פרוטוקול הפעלה, לחץ על התחל. הזן שם קובץ ולחץ על שמור. עכשיו בתוכנה, לחץ על תפריט התחלה ובחר הערכת שווי.
פתח את הקובץ ולאחר מכן, מתפריט הבחירה הנפתח, בחר FC-2.1 כדי לנתח את תא הייחוס הריק של חיישן פעיל שהוחסר עבור שלבי השיוך והדיסוציאציה של פפטידים msRBP4, msRBPR2 מוטנטי ו- msSTRA6. לאחר מכן, לחץ על התפריט הנפתח Kinetics או לחצן זיקה ובחר משטח מאוגד. בתיבת הדו-שיח בחירת עקומות, סמן את כלול עמודה בטבלה ולחץ על הבא.
כעת עבור אל תיבת הדו-שיח בחירת נתונים, הצג את החיישנים הריקים שהוחסרו. לחץ על קינטיקה ואהדה. שמרו על פרמטרי ברירת המחדל ולחצו על 'התאם' להתאמת עקומה.
בדוק את כרטיסיית הדוח עבור קבוע דיסוציאציה שיווי משקל Kd, שיעור אסוציאציה Ka או Kon ושיעור דיסוציאציה Kd או Koff. שמור את חיישן הנתונים Kinetics בכרטיסיית הטקסט בתבנית מוגבלת והשתמש בערכים להתוויית תרשימים.
