A subscription to JoVE is required to view this content.

English

אסיי המנגינה

Overview

אחד מסימני ההיכר של אפופטוזיס הוא פיצול הדנ"א הגרעיני על ידי גרעינים. אנזימים אלה מופעלים על ידי כספיות, משפחת החלבונים המבצעים את תוכנית המוות של התא. TUNEL assay היא שיטה המנצלת תכונה זו כדי לזהות תאים אפופוטוטיים. בבחינה זו, אנזים הנקרא מסוף deoxynucleotidyl transferase מזרז את התוספת של נוקלאוטידים dUTP לקצוות חינם 3 'של DNA מקוטע. באמצעות dUTPs המסומנים בתגים כימיים שיכולים לייצר פלואורסצנטיות או צבע, ניתן לזהות תאים אפופטוטיים באופן ספציפי.

הסרטון של JoVE על מבזק TUNEL מתחיל בדיון כיצד ניתן להשתמש בטכניקה זו כדי לזהות תאים אפופטוטיים. לאחר מכן אנו עוברים פרוטוקול כללי לביצוע בדיקות TUNEL על מקטעי רקמות והדמיה של התוצאות באמצעות מיקרוסקופיה פלואורסצנטית. לבסוף, מספר יישומים של ההסתה למחקר הנוכחי יכוסו.

Procedure

בדיקת TUNEL משמשת בדרך כלל כדי לזהות תאים העוברים אפופטוזיס, שהוא סוג של מוות תאים מתוכנת. אפופטוזיס הוא תהליך ביולוגי חשוב במהלך הפיתוח, ולשמירה על הומאוסטזיס של רקמות. כתמי TUNEL מאפשרים הדמיה וכימות של תאים אפופוטוטיים. זה עוזר למדענים לבדוק את היעילות של טיפולים חדשים להפרעות שבהן אפופטוזיס מעוכב, כמו בסרטן, או משופר, כמו ניוון עצבי.

וידאו זה יסביר כיצד ניתן להשתמש בבדיקת TUNEL כדי לתייג תאים העוברים אפופטוזיס, פרוטוקול שלב אחר שלב לביצוע שיטה זו במקטעי רקמות, וכיצד חוקרים מיישמים טכניקה זו כדי להבין מנגנוני מוו

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Tags

We use cookies to enhance your experience on our website.

By continuing to use our website or clicking “Continue”, you are agreeing to accept our cookies.

Learn More