Ricostruzione del circuito sanguigno in un modello di trapianto di cuore di topo addominale

Riepilogo

Viene dimostrata una nuova tecnica per la ricostruzione del circuito sanguigno in un modello eterotopico di trapianto di cuore di topo addominale.

Abstract

La tecnica chirurgica del trapianto di cuore addominale eterotopico nei topi è un modello standard per la ricerca nell'immunologia dei trapianti. Qui viene presentata la tecnica stabilita per una ricostruzione modificata del circuito sanguigno in un modello di trapianto di cuore addominale eterotopico. Questo metodo utilizza la vena cava inferiore intratoracica (IIVC) invece dell'arteria polmonare del cuore donatore per l'anastomosi alla vena cava inferiore del ricevente. Sta facilitando e migliorando i tassi di successo per il trapianto di cuore addominale nei topi.

Introduzione

La tecnica chirurgica del trapianto di cuore addominale eterotopico nei topi rappresenta un modello standard per la ricerca nell'immunologia dei^{trapianti 1,2,3}. Tuttavia, è molto difficile da eseguire e ciò implica una restrizione all'uso diffuso di questo modello^4,5.

Nel trapianto tradizionale di cuore di topo (THTx), l'aorta donatrice e l'aorta addominale ricevente vengono anastomosi mentre l'arteria polmonare è anastomosa alla vena cava inferiore^{ricevente 6,<....}

Protocollo

Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati condotti seguendo gli orientamenti della direttiva 2010/63/UE del Parlamento europeo sulla protezione degli animali utilizzati a fini scientifici (comitato Etico approvato, #G1071/09).

NOTA: La preparazione preliminare, l'anestesia, la cura post-operatoria e il lavoro di monitoraggio sono gli stessi eseguiti nei metodi^{chirurgici tradizionali 1,2,4}. I topi BALB/c sono stati donatori di cuore e C57BL/6J come riceventi di trapianti. I topi avevano un'età compresa tra 8 e 12 settimane, pesavano ~ 30 g al t....

Risultati

Qui viene presentata una tecnica modificata di trapianto di cuore addominale eterotopico nei topi che è stata precedentemente sviluppata nel nostro laboratorio e si è dimostrata utile negli ultimi 16 anni. In precedenza, è stato riferito che in generale 40 casi di vena cava a vena cava (gruppo V-V) rispetto a 40 casi della tradizionale arteria polmonare alla procedura di anastomosi vena cava (gruppo P-V)⁴ (Tabella 1) l'anastomosi del vaso ha preso 20,8±1,3 min nel gruppo V-V, .......

Discussione

La tecnica chirurgica del trapianto di cuore addominale eterotopico nei topi è molto impegnativa e questo implica una restrizione all'uso diffuso di questo modello.

Uno degli svantaggi della tecnica convenzionale è la lunghezza limite dell'arteria polmonare del donatore (PA). Di solito è di circa 2 mm di lunghezza, mentre la lunghezza dell'IIVC del cuore donatore utilizzato nel nostro modello è generalmente di circa 1 cm(Figura 2). Ciò significa che nel model.......

Materiali

Name	Company	Catalog Number	Comments
30G-needles	Braun	456300
acepromazine	CP Pharma	Tranquisol P
BALB/c AnNCrl mice	Charles River. Germany	no catalog number
Bepanthen eye ointment	Haus-Apotheke	PZN 01578675
Bonn Micro Forceps	FST	11083-07
Box for insulation and oxygen supply device	RUSKINN	INVIV
C57BL/6J  mice	Charles River. Germany	no catalog number
Carprofen	Zoetis	Rimadyl 50 mg/ml
CATHETER-FEP 26G	TERUMO	Surflo-W
Clip Applicator Forceps Style	FST	18057-14
Curved forceps	WPI	14114-G
custodiol/HTK	Dr. Franz Köhler Chemie	no catalog numer
Cutasept skin disinfection	VWR	BODL980365
electrosurgical pen	Bovie	CHANGE-A-TIP
gauze pads, cotton swabs	Lohmann-Rauscher	13353
Heating mat	THERMO MAT PRO 30W	HTP-30
Hemostatic sponge	CuraSpon	J1276A
heparine-solution	Haus-Apotheke	PZN 03029820
Ice box	PETZ	No Catalog Number available
Inhalation anesthesia device	GROPPLER	BKGM 0616
insulation and oxygen supply device	RUSKINN	INVIV
isoflurane	CP Pharma	Isofluran CP 1 ml/ml
ketamine	Zoetis	no catalog numer
metamizole	WDT	no catalog numer
Micro scissors	FST	15000-00,15000-10
Micro Serrefine ( Clamp ) Angled / 16 mm	FST	18055-06
Microscope	Leica	LEICAMZ6
Microscope light	SCHOTT	KL2500LED
Saline solution (NaCl 0.9%)	Haus-Apotheke	PZN 06178437
Scissors	Peha Instruments	991083/4
small Petri dish	Sarstedt	833900
Straight forceps	WPI	14113-G
surgical tape	BSN	4120
Suture Tying Forceps - 10 cm	FST	18025-10
Sutures(10-0)	Medtronic	N2540
Sutures(4-0)	ETHILON	V4940H
Sutures(7-0)	ETHILON	1647H
Syringe (0.3 mL)	BD	324826
Syringe (1 mL)	BD	320801
xylazine	Bayer	Rompun