Lesione da costrizione cronica del nervo infraorbitale distale (DIoN-CCI) nei topi per studiare il dolore neuropatico del trigemino

Riepilogo

La lesione cronica da costrizione del nervo infraorbitale distale nei topi induce cambiamenti nel comportamento spontaneo (aumento dell'attività di toelettatura del viso) e nel comportamento nocifensivo in risposta alla stimolazione tattile (iperreattività alla stimolazione dei capelli di von Frey) che sono segni di dolore in corso e allodinia e funge da modello per il dolore neuropatico trigemino.

Abstract

I modelli animali rimangono strumenti necessari per studiare il dolore neuropatico. Questo manoscritto descrive il modello di lesione da costrizione cronica del nervo infraorbitale distale (DIoN-CCI) per studiare il dolore neuropatico trigemino nei topi. Ciò include le procedure chirurgiche per eseguire la lesione da costrizione cronica e i test comportamentali postoperatori per valutare i cambiamenti nel comportamento spontaneo ed evocato che sono segni di dolore in corso e allodinia meccanica. I metodi e le letture comportamentali sono simili al modello di lesione da costrizione cronica del nervo infraorbitale (IoN-CCI) nei ratti. Tuttavia, sono necessari importanti cambiamenti per l'adattamento del modello IoN-CCI ai topi. In primo luogo, l'approccio intra-orbitale è sostituito da un approccio più rostrale con un'incisione tra l'occhio e il cuscinetto dei baffi. L'IoN è quindi legato distalmente al di fuori della cavità orbitale. In secondo luogo, a causa della maggiore attività locomotoria nei topi, consentire ai ratti di muoversi liberamente in piccole gabbie è sostituito dal posizionamento dei topi in dispositivi di contenzione progettati e costruiti su misura. Dopo la legatura DIoN, i topi mostrano cambiamenti nel comportamento spontaneo e in risposta alla stimolazione dei capelli di von Frey che sono simili a quelli dei ratti IoN-CCI, cioè un aumento della toelettatura diretta del viso e iperreattività alla stimolazione dei capelli di von Frey del territorio IoN.

Introduzione

Il dolore neuropatico deriva da un danno al sistema nervoso somatosensoriale, che porta a una trasmissione anomala di segnali sensoriali al cervello. Il danno ai nervi somatosensoriali non sempre porta a dolore neuropatico, ma la prevalenza aumenta con la gravità della neuropatia clinica ^1,2. I pazienti con dolore neuropatico sperimentano sintomi specifici come sensazioni spontanee (bruciore, formicolio, sensazioni elettriche) e dolore anormalmente intenso o prolungato a stimolazione innocua o nociva che tendono a diventare croniche e resistenti al trattamento con farmaci anti....

Protocollo

Gli animali sono trattati e curati secondo le linee guida per la ricerca sul dolore negli animali coscienti dell'Associazione Internazionale per lo Studio del Dolore e in linea con le normative fiamminghe ed europee per la ricerca sugli animali e le linee guida ARRIVE. Il protocollo è approvato dal Comitato Etico istituzionale.

1. Animali

1. Utilizzare topi C57BL/6J maschi e femmine (Janvier, 10 settimane all'arrivo).
2. Alloggiare topi maschi e femmine separatamente in gabbie standard per topi a fondo solido in una stanza di colonia con un'umidità del 40%-60% e una temperatur....

Discussione

Nei ratti, è stato precedentemente sostenuto che un approccio intra-orbitale all'IoN è preferibile, considerando l'importanza di una muscolatura fine intatta che controlla i complessi modelli di frusta nella discriminazione vibrissotattile e la distanza relativa dell'incisione della linea mediana al territorio del nervo infraorbitale cutaneo¹⁰. Altri hanno sostenuto che un approccio distale attraverso un'incisione nella pelle pelosa caudale al cuscinetto vibriss.......

Materiali

Name	Company	Catalog Number	Comments
Chromic catgut (6-0)	Dynek	CG602D	ligatures
Cotton applicator	Pharmacy
Digital video camera	Sony	HDR-CX330E
Dumont #5 forceps	Fine Science Tools	11251-10
Dumont forceps - Micro-blunted tips (#5/45)	Fine Science Tools	11253-25
Duratears	Alcon	0037-820	ophthalmic ointment
Hooked ligation aid	Fine Science Tools	18062-12
Ketalar	Pfizer		ketamine (50 mg/mL)
Operation microscope	Kaps	SOM 62
Precision cotton swab	Qosina	10225
Precision trimmer	Philips	HP6392/00
Rompun	Bayer		xylazine (2%)
Scissors - blunt tips	Fine Science Tools	14574-09
Semmes-Weinstein Von Frey Aesthesiometer kit	Stoelting	58011
Vicryl Rapide	Ethicon	MPVR489H	sutures