Una preparazione del modello modificata per la riperfusione dell'occlusione dell'arteria cerebrale media

Riepilogo

Questo protocollo descrive il processo di preparazione alla riperfusione dell'occlusione dell'arteria cerebrale media attraverso l'arteria carotide comune.

Abstract

Il modello di riperfusione per occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAO/R) è fondamentale per comprendere i meccanismi patologici dell'ictus e per lo sviluppo di farmaci. Tuttavia, tra i metodi di modellazione comunemente usati, il metodo Koizumi è spesso oggetto di esame a causa della sua legatura dell'arteria carotide comune (CCA) e della sua incapacità di ottenere un'adeguata riperfusione. Allo stesso modo, il metodo Longa è stato criticato per la disconnessione e la legatura dell'arteria carotide esterna (ECA). Questo studio mira a introdurre un metodo di preparazione del modello modificato che preservi l'integrità dell'ECA, che preveda l'inserimento di una sutura in nylon monofilamento attraverso il CCA, la riparazione dell'incisione CCA legata e il mantenimento della riperfusione dal CCA. La riperfusione del flusso sanguigno è stata confermata utilizzando l'imaging laser speckle flow. Metodi di valutazione come la scala Longa, il punteggio di gravità neurologica modificata, la colorazione con trifeniltetrazolio cloruro (TTC) e la marcatura in immunofluorescenza dei neuroni hanno dimostrato che questo approccio potrebbe indurre un danno stabile al nervo ischemico. Questo protocollo modello MCAO/R modificato è semplice e stabile e fornisce una guida preziosa per i professionisti nel campo dell'ischemia cerebrale.

Introduzione

Secondo l'Organizzazione Mondiale della Sanità, l'ictus è rimasto la seconda causa di morte in tutto il mondo nell'ultimo decennio, con un alto tasso di incidenza, un'elevata mortalità e un alto tasso di disabilità ^1,2. Con l'invecchiamento della popolazione globale, si prevede che l'incidenza dell'ictus aumenterà nei paesi in via di sviluppo, diventando potenzialmente la principale causa di morte prematura e disabilità negli adulti. Inoltre, c'è una tendenza per gli ictus che si verificano a un'età più giovane di³ anni. La perdita di forza lavoro dopo un ictus pone anche un pesante far....

Protocollo

Il protocollo sperimentale è stato condotto in conformità con le linee guida del Comitato per l'uso e la cura e l'uso degli animali istituzionali presso l'Università di Medicina Tradizionale Cinese di Chengdu (Numero di registrazione: 2019-DL-002). Tutti i dati della ricerca sugli animali sono stati documentati seguendo le linee guida ARRIVE (Animal Research: Reporting In Vivo Experiments). Per questo studio sono stati utilizzati ratti maschi Sprague Dawley (SD) di peso compreso tra 250 g ± 20 g e di età compresa tra 6 e 8 settimane. Le specifiche relative agli animali, ai reagenti e alle attrezzature impiegate sono elencate nella Tabella dei material....

Discussione

Il modello di occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAO) indotta da una sutura in nylon monofilamento è il metodo più comune utilizzato per la preparazione di modelli MCAO. Questo approccio è ampiamente adottato negli studi preclinici e ha ottenuto il riconoscimento di molti professionisti grazie alla sua semplicità, alla mancanza di necessità di craniotomia, al trauma chirurgico minimo e alla capacità di ottenere la riperfusione.

Esistono due tecniche chirurgiche classiche per il fi.......

Materiali

Name	Company	Catalog Number	Comments
Animal anesthesia system	Rayward Life Technology Co., Ltd	R500IE
Animal temperature maintainer	Rayward Life Technology Co., Ltd	69020
Cy3 secondary antibody	Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd	GB21303
DAP1 antibody	Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd	G1012
DCX antibody	Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd	GB13434
Goat serum	Beyotime Biotechnology Co., LTD	C0265
GraphPad Prism	GraphPad Software	GraphPad Prism 8.0
ImageJ	National Institutes of Health	ImageJ software
Isofluran	Rayward Life Technology Co., Ltd	R510-22
Laser speckle blood flow imaging system	Rayward Life Technology Co., Ltd	PeriCam PSI NR
MAP-2 antibody	Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd	GB11128
Miniature hand-held skull drill	Rayward Life Technology Co., Ltd	87001
monofilament suture	Rayward Life Technology Co., Ltd	250-280g
NeuN antibody	Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd	GB11138
OCT embedding agent	BIOSHARP	BL557A
Penicillin sodium	Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd.	17121709-2
Quick Antigen Retrieval Solution for Frozen Sections	Beyotime Biotechnology Co., LTD	P0090
SD rats	SPF ( Beijing ) Biotechnology Co.,Ltd.	250-280g
Triton X-100	Beyotime Biotechnology Co., LTD	ST795
TTC	Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd.	2019030101