Dopo aver indotto una lieve lesione cerebrale traumatica in un ratto anestetizzato, posizionarlo sulla schiena all'interno di una gabbia pulita. Posizionare un'imbottitura in schiuma sotto la trave di bilanciamento per ridurre il rischio di lesioni ai ratti in caso di cadute durante il test. Posizionare una scatola di fuga a un'estremità della trave.
Attivare la videocamera per registrare il test. Una volta che l'animale si è ripreso, posiziona i ratti all'altra estremità della trave di equilibrio. Posiziona i ratti sul fascio largo due centimetri per una serie di cinque prove consecutive.
Registra l'inizio e la conclusione di ogni prova quando il naso del ratto attraversa rispettivamente la linea di partenza e quella di arrivo. Prepara l'arena in campo aperto, assicurandoti che sia pulita e priva di qualsiasi segnale di odore precedente. Dividi l'arena in tre zone distinte: una zona interna centrale, una zona centrale e una zona esterna.
Posiziona un topo al centro dell'arena in campo aperto e avvia il timer. Consenti al topo di esplorare liberamente l'arena per una durata di cinque minuti. Dopo questo periodo, rimetti con cura e delicatezza il ratto nella sua gabbia di casa.
Quantificare la distanza totale percorsa dal ratto durante il periodo di esplorazione di cinque minuti. Inoltre, determina la quantità di tempo che il ratto trascorre nelle tre zone. Assicurarsi che l'apparato del labirinto d'acqua sia in condizioni di funzionamento adeguate.
Posizionare la piattaforma a una profondità di 2.5 centimetri sotto la superficie dell'acqua. Tingi l'acqua di nero e posiziona i segnali nelle quattro direzioni cardinali. Stabilire un sistema di monitoraggio per registrare e osservare il comportamento dei ratti.
Quindi introduci il topo nel labirinto d'acqua. Se il ratto non è in grado di raggiungere la piattaforma entro due minuti, guidalo delicatamente usando un bastone di legno. Lascia che il topo si abitui all'ambiente del labirinto mentre si trova sulla piattaforma per una durata di 20 secondi, quindi rimuovilo.
Il sesto giorno, che è il giorno del test della sonda, rimuovere la piattaforma dal labirinto d'acqua e posizionare il ratto nello stesso quadrante per una durata di due minuti. Impiega il sistema di monitoraggio per osservare e registrare continuamente il comportamento del ratto. La coordinazione motoria è stata valutata prima e dopo l'anestesia o la lesione utilizzando il compito del raggio.
Al primo giorno dopo l'infortunio, i ratti con mTBI hanno mostrato un numero significativamente maggiore di scivolamenti degli arti posteriori rispetto ai ratti sham. Tuttavia, dopo due giorni, gli slittamenti degli arti posteriori sono tornati a livelli fittizi. Tutti e sei i ratti con mTBI presentavano più scivolamenti degli arti posteriori dopo l'impatto, senza differenze nei tempi di attraversamento del fascio tra i ratti con mTBI e quelli con sham.
La distanza percorsa non ha mostrato differenze significative tra i gruppi sham e mTBI. Il comportamento ansioso era evidente nei ratti con mTBI a tre e sette giorni dopo l'infortunio, trascorrendo meno tempo nella zona centrale durante il test in campo aperto. I risultati del labirinto d'acqua di Morris hanno indicato una compromissione dell'apprendimento spaziale e della memoria nei ratti con mTBI.
Hanno impiegato più tempo per trovare la piattaforma nascosta e hanno impiegato meno tempo a cercare la piattaforma rimossa durante la prova della sonda senza differenze nella velocità di nuoto che suggerivano alcun impatto sulla funzione locomotoria spontanea.
