Per iniziare, tieni saldamente in posizione la testa dei topi appena nati sottoposti a eutanasia. Usando delle micro forbici operatorie, aprire il cuoio capelluto lungo la sutura sagittale. Quindi, separare e immobilizzare il cuoio capelluto bilateralmente con le dita.
Usa le forbici per recidere il cranio e capovolgilo in avanti per accedere al cranio. Impiega un piccolo elevatore periostale per estrarre il cervello e poi usa la punta delle forbici per raschiare delicatamente il cervello, rivelando la base del cranio. Ora, esamina le ossa temporali bilaterali alla base del cranio.
Usa le forbici per incidere la base del cranio lungo la linea mediana. Quindi, raschiare via la pelle ed eliminare l'osso non necessario. Conservare e trasferire le ossa temporali in piastre di Petri sterili da 35 millimetri riempite con HBSS fresco.
Successivamente, utilizzare un paio di pinze a 5 punte numeriche per eliminare la bola e il tessuto circostante dalla porzione petrosa dell'osso temporale. Tenere la pinza con una mano per stabilizzare la parte semicircolare dell'osso temporale. Usa l'altra mano per inserire la punta inferiore della pinza nella nicchia rotonda della finestra, separando l'osso laterale della coclea dalla scala del vestibolo.
Rimuovere con cautela la porzione petrosa dell'osso temporale senza entrare in contatto con l'epitelio dell'organo di Corti. Quindi, staccare ed estrarre meticolosamente il labirinto osseo della coclea, partendo dall'estremità basale fino a quella apicale. Utilizzando una pinza a 5 punte, microisolare accuratamente l'epitelio sensoriale dell'organo di Corti dal modiolo.
Successivamente, utilizzare una pinza microoperativa per tenere il legamento a spirale e separarlo delicatamente dalla stria vascolare. Trasferire l'epitelio uditivo pulito, utilizzando una pipetta da 200 microlitri, in una piastra di coltura sterile da tre millimetri contenente HBSS. Posizionare l'epitelio uditivo isolato in una capsula di Petri sterile da 100 millimetri riempita con HBSS per le successive fasi di preparazione.
