Per iniziare, posizionare da tre a sei embrioni dechorionati in una capsula di Petri contenente terreno Danios integrato con lo 0,02% di tricaina. Una volta che gli embrioni sono stati anestetizzati, trasferirli in un piatto di vetro da 35 x 15 millimetri con un mezzo minimo. Aggiungere rapidamente da 300 a 400 microlitri di agarosio a basso punto di fusione all'1% contenente tricaina per creare una cupola.
Usando una pinza, posiziona gli embrioni in modo che si trovino direttamente a contatto con il vetro con il lato ventrale rivolto verso l'alto. Successivamente, depositare circa 0,5 microlitri di perle magnetiche sopra l'agarosio. Quindi aggiungere una goccia di Danios medium contenente lo 0,02% di tricaina sopra l'agarosio e le perline.
In base al campione e alle dimensioni del cuore, selezionare la perlina appropriata e utilizzare una pinzetta per posizionarla sopra il tuorlo dell'embrione. Crea una lesione o un buco nel tuorlo al centro del tuorlo usando un braccio delle pinzette. Posizionare la perlina nella lesione e spingerla delicatamente anteriormente fino a raggiungere il polo venoso.
Se l'aspirazione da sola non è sufficiente per spostare il cordone, spingerlo delicatamente verso l'atrio, applicando una pressione sufficiente per guidarlo nella cavità pericardica. Dopo aver innestato le perle magnetiche negli embrioni, aggiungere uno o due millilitri di terreno Danios contenente PTU al piatto con fondo di vetro. Quindi, utilizzando una pinzetta, rompere delicatamente l'agarosio a basso punto di fusione e rimuovere con cura gli embrioni.
Infine, utilizzando una pipetta Pasteur, trasferire gli embrioni in una nuova piastra di Petri contenente terreno Danios con PTU e lasciarli recuperare e svilupparsi a 28,5 gradi Celsius. La perlina magnetica è stata posizionata correttamente all'interno dell'atrio del cuore del pesce zebra, consentendo un flusso sanguigno senza ostruzioni e nessuna emorragia osservata con le pareti cardiache mantenute.
