Indurre lesioni acute al fegato nei ratti tramite Carbon Tetrachloride (CCl₄) Esposizione attraverso un tubo orogastrico

Vorrei presentare il nostro lavoro sulle lesioni acute indotte al fegato nei ratti attraverso l'esposizione al tetracloruro di carbonio attraverso il tubo orogastrico. Seleziona ratti maschi adulti Sprague-Dawley del peso di 300-350 grammi. Fornire chow di ratto e acqua ad libitum.

Eseguire tutti gli esperimenti tra le sei:00 e le 12:00. La commedia sulla cura degli animali della Ben-Gurion University del Negev, Israele ha approvato tutte le procedure di trattamento e test utilizzate in questo protocollo. Mantenere i ratti a temperatura ambiente di 22 Gradi Celsius con luci di 12 ore e cicli scuri di 12 ore. Cannulate la vena di coda con un catetere calibro 22.

Raccogliere campioni di sangue al basale. L'analisi biochimica del sangue include la misurazione del siero GOT, GPT e bilirubina totale. L'esame degli enzimi epatici e del livello totale di bilirubina è stato effettuato nel laboratorio biochimico del Soroka Medical Center.

Attenzione: l'esposizione ad un'alta concentrazione di tetracloruro di carbonio, incluso il vapore o l'assorbimento cutaneo, può influenzare il sistema nervoso centrale, degenerare il fegato e i reni e l'esposizione prolungata può portare al coma o alla morte. Preparare una soluzione al 50% di tetracloruro di carbonio miscelato con olio d'oliva come veicolo in un rapporto uno a uno. Indurre la pathotossicità in vivo mediante somministrazione di tetracloruro di carbonio attraverso un tubo orogastrico.

Inserire un tubo orogastrico attraverso la cavità orale del ratto. Esporre i ratti a diverse dosi di tetracloruro di carbonio. Un millilitro al chilo per lieve lesione epatica acuta, due punti cinque millilitri al chilo per lesioni epatiche acute moderate o cinque millilitri al chilo per gravi lesioni epatiche acute.

Per il gruppo fittizio, esporre i ratti a cinque millilitri per chilo solo olio d'oliva. Raccogliere campioni di sangue a 24 ore dall'esposizione al tetracloruro di carbonio. L'analisi biochimica del sangue include la misurazione del siero GOT, GPT e bilirubina totale.

Posizionare il ratto morto sulla tavola dissezionante nel ricombinante dorsale con l'addominale rivolto verso l'alto e radersi l'addome. Usando il bisturi, incidere l'intera lunghezza del ventrum dall'ano al mento. Riflettere la pelle.

Con il bisturi, incidere la parete addominale dall'ano alla cartilagine xifoide per esporre i visceri addominali. Trasferire il fegato in una piastra di Petri. Eseguire una colorazione ematossilina ed eosina.

Esaminare le fette al microscopio ingrandimento di 200 volte con una lunghezza oggettiva di 20 millimetri. La sezione epatica deve essere graduata da un patologo specializzato, accecato al protocollo di trattamento. Il punteggio di zero indica nessuna anomalia epatica, uno a due indica una lieve lesione epatica, da tre a quattro indica una lesione epatica moderata e da cinque a sei indica gravi lesioni al fegato.

I vari gruppi di ratti in momenti diversi sono mostrati sullo schema. 24 ore dopo aver introdotto lesioni epatiche acute, c'è stato un aumento significativo dei livelli di GOT, GPT e bilirubina totale, a seconda del tetracloruro di carbonio esposto rispetto al gruppo di controllo. Il valore P era minore di zero punto zero zero uno.

I cambiamenti istopatologici sono stati osservati dopo 24 ore in tutti i gruppi dopo intossicazione da tetracloruro di carbonio in varie dosi. Il punteggio di classificazione istologico a 24 ore tra tutti e tre i gruppi interventisti al gruppo di controllo è stato significativamente più alto. Il valore P era minore di zero punto zero cinque.

Il nostro gruppo di ricerca ha presentato il metodo comune e fisico della lesione epatica acuta indotta nei ratti attraverso l'esposizione al tetracloruro di carbonio attraverso il tubo orogastrico. Questo metodo viene utilizzato per indagare la fisiopatologia della lesione epatica acuta e per testare diversi sulla strategia protettiva. La ringrazio molto per l'attenzione.