Ciò che questo protocollo non solo imita l'insorgenza e lo sviluppo di FTCD clinici, ma fornisce anche un modello animale affidabile per valutare i trattamenti terapeutici contro FTCD. Ma questa tecnica è facile da eseguire e consente l'osservazione della crescita immediatamente dopo l'infortunio. Questa tecnica può imitare con successo i difetti clinici della cartilagine fornendo una piattaforma per lo studio del processo patologico dei difetti della cartilagine e lo sviluppo di farmaci terapeutici corrispondenti.
Questo metodo potrebbe essere applicato per studiare i difetti traumatici della cartilagine, vale a dire l'artrosi post-traumatica. Quando si tenta questa tecnica per la prima volta è importante flettere la tibia e il perone con un angolo di 90 gradi per esporre completamente la cocleare del condilo femorale e mantenere la punta del trapano perpendicolare alla superficie della cartilagine. Inizia posizionando un ratto anestetizzato sul tavolo operatorio in posizione supina.
Posizionare un drappo sterile sul ratto, esponendo l'articolazione del ginocchio rasata e disinfettata. Utilizzando una lama di bisturi numero 11 fare un'incisione verticale di un centimetro nel mezzo dell'articolazione del ginocchio. E tagliare la capsula articolare e il tendine del quadricipite femorale lungo il bordo della rotula mediale.
Quindi, ruotare la rotula verso l'esterno e flettere la tibia e il perone con un angolo di 90 gradi, Per esporre il condilo femorale. Utilizzando una punta circolare da 1,6 millimetri, creare un difetto della cartilagine profondo 0,1 millimetri nel condilo femorale. Pulire il sito chirurgico con batuffoli di cotone imbevuti di soluzione salina allo 0,9% e sostituire la rotula.
Quindi mantenendo il ginocchio in una posizione estesa sutura l'incisione strato per strato utilizzando suture 4-0 non assorbibili. Per misurare la soglia di prelievo meccanico o MWT dei ratti, posizionare l'animale in una singola camera di plastica su una piattaforma di rete metallica. Posizionare la base in rete metallica a 50 centimetri sopra un tavolo.
Iniziare la misurazione MWT dopo 30 minuti di adattamento. Quindi, premere il filamento Von Frey perpendicolarmente sulla superficie della fioriera della zampa posteriore del ratto. Quindi piegare il pennello per due secondi evitando la parte più spessa della porzione centrale della zampa.
Aumentare gradualmente il peso dello stimolo da 4 grammi, fino a quando non si verifica una risposta positiva come il ritiro della zampa o il leccare. 3 giorni dopo la modellazione dei ratti nel gruppo modello hanno mostrato una riduzione del MWT rispetto al gruppo sham. Suggerire iperalgesia nel gruppo modello.
Il MWT del gruppo modello è rimasto basso anche dopo 17 giorni. Indicativo della durata della sensibilità al dolore. La colorazione istopatologica del gruppo sham ha mostrato una chiara superficie articolare e cartilaginea intatta, una distribuzione uniforme dei condrociti e un'alta espressione del collagene di tipo II.
Al contrario, il gruppo modello dimostra superfici cartilaginee depresse, perdita di condrociti, aumento dell'espressione della metalloproteinasi della matrice MMP13 e diminuzione dell'espressione del collagene di tipo II. La cosa più importante da ricordare è che la rotula deve essere ridotta prima della sutura.
