マウスの鎮痛効果を研究するための修正炎症性疼痛モデル

要約

ここでは、鎮痛効果を評価するために、両後足のカラギーナン注射による修正された炎症性疼痛モデルを紹介します。

要約

ホットプレート試験は、マウスの炎症性疼痛に対する鎮痛効果を評価するために広く使用されています。炎症性疼痛の一般的に使用されるモデルは、片方の後足にカラギーナンの足底内注射によって誘発されました。しかし、私たちの研究室からの発見は、カラギーナンの単一の後足注射を受けたマウスが、ホットプレートテスト中に熱侵害受容を避けるために前足を持ち上げることを示しました。この応答のため、以前の注入方法では熱痛の閾値を正確に反映することはできません。そこで、この問題を回避するための新たな方法を検討しました。本研究では、炎症性疼痛のモデルを確立するために、カラギーナンを両後足に注入することにより、以前の方法を修正しました。その結果、カラギーナンによる両後足注射は感度が高く、ホットプレートテストを使用すると、片足後足注射よりも炎症性疼痛を誘発する方法として優れていることが示された。これらの知見に基づいて、カラギーナンを後足両方または後足一足注射したマウスにセレコキシブ(30 mg / kg)を胃内投与する実験をさらに設計しました。ホットプレート試験の結果は、セレコキシブがカラギーナンの両後足注射を受けたマウスでは熱痛閾値を増加させたことを示しましたが、カラギーナンの片足後足注射をしたマウスでは増加しませんでした。.要約すると、我々は、鎮痛効果を評価するための炎症性疼痛のモデルを誘発する優れた方法を開発しました。

概要

痛みは世界中の公衆衛生上の問題です。これは、有害な熱的、機械的、または化学的刺激によって引き起こされます。倫理的な懸念から、人間で疼痛研究を行うことは困難です。したがって、動物の痛みモデルを使用することは、痛みのメカニズムを理解し、治療法を研究するための重要なアプローチです¹。ホットプレート試験は、熱侵害受容および痛覚過敏の評価に広く使用されています²。現在、ホットプレートテストに使用される炎症性疼痛のモデルは、片方の後足にカラギーナンの足底内注射によって誘発されます。例えば、ロチゴチンを充填したマイクロスフェアの抗侵害受容効果を調査するために、炎症性疼痛の動物モデルを片足後^足注射3によって調製した。マウスの熱侵害受容に対するカテコール-o-メチルトランスフェラーゼ阻害剤の効果を評価するために、カラギーナンを右後肢^の足底領域に投与した4。 Posidonia oceanica (L.) Delileの抽出物の鎮痛作用を調べるために、マウスにおいてカラギーナンの足底内注射により炎症性疼痛モデルを作製^した5。しかし、私たちの研究室からの発見は、カラギーナンの単一の後足注射を受けたマウスが熱侵害受容を避けるために前足....

プロトコル

この実験プロトコルは、煙台大学の動物施設管理および使用委員会によって承認されました(No.YTDX20220425)。手順は、国立衛生研究所の実験動物の使用に関するガイドラインに従っていました。

1. 動物たち

1. 実験には、体重20〜25 gのICR雌マウスを使用します。
2. 実験を開始する前に、動物が実験室の環境に3日間順応するのを待ちます。
3. 実験室を12時間の明暗サイクルで維持し、マウスが水とチャウに自由にアクセスできるようにします。

2.カラギーナン溶液の調製

1. キャラギーナン0.1gの重さを量ります。滅菌した生理食塩水10mLをチューブに加えます。
2. 0.1 gのカラギーナンをチューブに加え、チューブを30秒間ボルテックスします。
3. 1%滅菌したカラギーナン溶液を収集します。
4. 実験の前にカラギーナン溶液を準備します。

3. カラギーナンの足底内注射

1. シリンジ(0.05 mL、29G x 1/2インチ、0.33 mm×12.....

結果

炎症性疼痛モデルにおける疼痛閾値
カラギーナンの片足後足注射による炎症性疼痛モデルの痛みの閾値は32.23±11.11秒でしたが、対照群の痛みの閾値は27.73±7.08秒でした。対照群と比較して、片足後足注射モデルの痛みの閾値は有意な減少を示さなかった(p > 0.05、 図1A)。カラギーナンの両後足注射による炎症性疼痛モデルの痛みの.......

ディスカッション

痛みは、組織の損傷や損傷によって引き起こされる保護反応です。しかし、それはまた生活の質に悪影響を及ぼします¹⁰。したがって、効果的な鎮痛薬の開発と痛みのメカニズムの探求は、依然として活発な研究分野です。疼痛の評価方法は、鎮痛薬の開発において重要な役割を果たしています。カラギーナンの片足後足注射は、ホットプレート試?.......

資料

Name	Company	Catalog Number	Comments
AL204 electronic balance	Yuheng Battery Co., Ltd	YH-400A
Carboxymethylcellulose	Tianjin Chemical Co., Ltd	20210326
Carrageenan	Sigma, MO, USA	29H0715
Celecoxib	Pfizer Inc.	8142838
Hot plate	UGO Ltd. Co., Italy	PB-200
ICR female mice	Jinan Pengyue  Co., Ltd.	SCXK20220007
Normal saline	Kelun Pharmaceutical Co., Ltd	H51021157