Viral Construct (AAV) Injection in Mouse Superior Colliculus for Calcium Imaging

まず、麻酔をかけたマウスをイヤーバー付きの脳定位固定装置に固定します。マウスの目に点眼軟膏を塗って乾燥を防ぎ、サーモスタット加熱パッドでマウスの体温を摂氏37度に保ちます。毛皮を剃り、手術部位を殺菌した後、リドカイン、チリジン、メロキシカムを注射します。

SCの皮膚が取り除かれたら、綿棒で頭蓋骨をきれいにします。頭蓋骨の表面が平らになるまで脳定位固定装置フレームを調整します。ドリルを使用して、硬膜が露出するまで、ラムダの外側0.5ミリメートル全体と前方0.42ミリメートルを作成します。

GCaMP6mを発現するアデノ随伴ウイルス(AAV)を、面取りガラスマイクロピペットを使用して、ラムダから1ミリメートルと1.6ミリメートルの深さに注入します。注入後、ゆっくりとインジェクターを引き出し、ヘッドプレートの埋め込みを進めます。