人工食の準備のための計量材料を含むレシピを印刷します。寒天を除くすべての乾燥成分を1つの容器に入れます。乾燥した成分混合物をブレンダーに入れ、成分混合物に5ミリリットルの亜麻仁油を加えます。
各ダイエットバッチに15グラムの細かいメッシュ寒天を1リットルのビーカーに400ミリリットルの蒸留水と混ぜます。寒天が沸騰に近づくまで電子レンジで混合物を加熱し、混合物全体に細かい泡が入ります。沸騰したら、400ミリリットルの蛇口温度の蒸留水を加えて温度を下げ、乾燥成分と混ぜます。
次に、74オンスのダイエットカップを、端が触れるようにカウンターに置きます。寒天混合物をブレンダーに加えて、完全に混合します。混合後、混合物をダイエットカップに注ぎ、ダイエットが各カップの底を覆うようにします。
食事が冷めたら、カップに蓋をします。カップにダイエットタイプのラベルを付け、トレイに積み重ねます。ハウスホスト植物は、摂氏24度の気候チャンバー内にメッシュカバーが付いた30オンスのデリカップに蝶の卵を残します。
1週間後、カップに後期1齢幼虫または初期2齢幼虫がないか調べます。絵筆を使用して、幼虫を人工食に移します。各4オンスのカップに3匹の幼虫を入れます。
カップを横向きにしてプラスチック製のゴミ箱に入れ、フラスが底に落ちて食事から離れるようにして、カビや病気のリスクを減らします。ダイエットカップは、低から中程度の光レベルの制御された温度条件で収容します。透明なカップの蓋を通して検査することにより、1〜2日ごとにカップのカビや病気を監視します。
幼虫が蛹化してダイエットカップに出てくるのを待ちます。きれいな手でカップから成虫の蝶を慎重に取り除き、4つの翼すべてを体に近づけて安定させます。蝶をマークするには、乾いた個体を頭と胸部で保持します。
次に、細い先端のシャーピーを使用して、後翼に番号をマークします。羽のマーキングと性器検査を組み合わせて蝶の性別を判断します。次に、片方の手で大人の頭と胸部をつかみ、もう一方の手でワックスグラシンエンベロープを開きます。
次に、成虫を封筒に移し、封筒を通して翼を固定します。実験の前に、蝶を摂氏5〜6度で最大1週間維持します。このケーススタディでは、ニッケル濃度の増加による蝶の生存率は影響を受けませんでしたが、銅と亜鉛の両方に有意な効果がありました。
蝶の発育速度は銅と亜鉛の影響を受けました。銅濃度が増加するにつれて、開発時間が増加し、50ppmから始まる対照から大幅に逸脱しました。亜鉛濃度が増加するにつれて、現像時間が増加し、100ppmから始まる対照から大幅に逸脱した。