まず、2つの保持ホルダーを準備します。軽いワイヤーペンチと0.014インチのオーストラリアンワイヤーを使用して、らせん状のループを作成します。次に、カスタマイズされたステンレス鋼のスプリングを準備し、スプリングを適切な長さにカットします。
また、長さ7ミリのオーストラリア線または鋼線を1本用意し、直径2ミリの紙を2枚切ってバリアとして使用します。次に、麻酔をかけたマウスを手術台に置き、脱毛クリームやシェーバーで頭のてっぺんの毛を丁寧に取り除きます。次に、ヨードホルムと75%アルコールを交互に使用してマウスの頭皮を消毒します。
マウスの頭を上に置き、サージカルテープを使用して手足を手術台に固定します。次に、外科用ハサミを使用して、マウスの首の近くの頭皮に沿って弓状のフラップを行い、矢状縫合糸と周囲の頭蓋骨を完全に露出させます。次に、手術台に6-0縫合糸で頭皮フラップを固定します。
頭蓋骨を乾かし、37%リン酸で20秒間エッチングします。次に、通常の生理食塩水を使用して酸エッチングをクリーンアップします。矢状縫合糸から3ミリメートル離れた頭頂骨の両側に2つのホルダーを置き、軽く硬化した接着剤で接着します。
次に、頭皮フラップを元に戻します。ホルダーの位置にラベルを付け、対応する位置で頭皮に2つの小さな穴を開けます。小さなループを同時に穴に通して皮膚表面を露出させることで、フラップスカルプをリセットします。
スプリングとガイドワイヤーを取り付けるには、スプリングを2つのホルダー間の距離より1ミリ長く切断します。プレッシャースプリングを圧縮し、両側の小さなコイルの間に置きます。小さなコイルとスプリングにステンレス鋼線を通し、スプリングを解放して約30Gの始動推力を得ます。
次に、スプリングとホルダーの間に2枚の紙切れを置き、光硬化接着剤で接着して、スプリングの両端にバリアを設置します。拡張後、マイクロCTを使用して頭蓋縫合糸の変化を視覚化しました。対照群と比較して、頭蓋縫合糸は1日力を加えた後、徐々に有意に拡大し、5日目以降は骨縁にふわふわの骨突起が現れた。
また、二重標識法を用いた石灰化の可視化により、力負荷が有意に骨形成を活性化することを示した。7日後に新たに石灰化した骨が観察され、縫合糸拡張後の骨のリモデリング過程が示された。
