まず、4匹の成虫を線虫増殖培地または大腸菌OP50を播種したNGM寒天プレートに置きます。第1世代の線虫をNGMプレート上で摂氏23度の温度で7日間飢餓状態まで増殖させます。次に、少量のドッグフード寒天培地またはDFA培地を、大腸菌OP50を播種した新しいNGMプレートの中央に移します。
光遺伝学的実験では、線虫の接種前に40マイクロリットルのオールトランスレチナールをDFAに注ぎます。次に、プレートの蓋から約2ミリメートル離れたDFA培地に0.5ミリグラムのドッグフードを置きます。NGMプレートに紫外線を15分間照射し、コンタミネーションを回避します。
滅菌水を使用してNGMプレートから飢餓状態のワームを収集します。次に、集めた線虫をNGMにあるDFA培地に接種します。ワームを摂氏23度で繁殖させ、10〜14日かけてプレートの蓋に向かって登れるようにします。
湿度が上昇すると、最終的に崩壊する前に、ワームネットワークパターンのコンパートメントサイズが大きくなり、蓋の内面に休眠中のワームクラスターが残りました。