虚血再灌流前後の冠動脈血流予備能(CFR)の動的変化の評価

まず、麻酔をかけたマウスの前胸部から脱毛クリームを使用して脱毛し、マウスを背にして生理学的モニタリングプラットフォームに置きます。生理学的モニタリングテーブルの銅シートに少量の導電性ゲルを塗布します。マウスのポーズをこのゲルに固定して、心電図と呼吸データのキャプチャを容易にします。

最適な画質を確保するために、少量の超音波透過ゲルを塗布します。プローブとプラットフォームの間に小さな角度でプラットフォームを横方向に位置合わせし、心臓の胸骨傍長軸図を取得します。次に、Bモードで適切な心臓部分を見つけます。

タッチスクリーンでカラードップラーをアクティブにし、プローブを少し動かして正しい位置を見つけます。次に、対応するボタンを押してパルスウェーブモードに切り替えます。黄色のインジケーターラインを冠動脈に流れの方向に平行に配置し、[クリップの保存]ボタンを押してベースラインデータを文書化します。

イソフルラン濃度を3%に上げ、30秒間待ちます。流速が時間とともに徐々に増加することを確認してください。Save Clipボタンを頻繁に押して、最高速度での血流をキャプチャします。

心エコーイメージングが完了したら、動物をプラットフォームから慎重に取り外します。ピーク速度関数ツールを使用して、ピーク拡張期速度を測定し、取得した画像を使用して心臓の収縮期機能を評価します。最大流量での拡張期ピーク冠状動脈流速をベースラインでの拡張期ピーク冠状動脈流速度で割って CFR を計算します。

心臓を露出させるために、4番目の肋間腔で開胸術を行います。次に、5-0シルク縫合糸を使用してLAD動脈を結紮します。虚血性心筋の下流の変色を可視化する視覚的確認により、マウスの虚血を確認します。

LAD動脈閉塞を30分間行います。次に、結紮糸を放出し、変色した心筋領域の発赤を1〜2分間監視することにより、再灌流を確認します。冠状動脈閉塞および再灌流後、胸部を層状に閉じ、マウスを約30分間回復させます。

前に示したように、再灌流の1、3、5、8、24、および48時間後にCFRを再度測定します。虚血再灌流手術の前に、CFRベースラインが測定され、マウスのCFR値は正常でした。しかし、手術後、再灌流の1時間後にCFRが著しく減少しました。

再灌流時間が長くなると、CFR値は一貫して低いままであり、低灌流が少なくとも2日間持続する可能性があることを示唆しています。マウスでCFRが有意に低下した場合、左心室心機能に有意な変化は観察されませんでした。