10マイクロモルのDcfh-DA蛍光プローブをMCF7細胞に添加し、摂氏37度で20分間インキュベートします。インキュベーション後、細胞をPBSで3回洗浄することにより、余分なDcfh-DAを除去します。次に、蛍光顕微鏡を用いて、励起波長488ナノメートル、発光波長525ナノメートルで蛍光強度を検査します。
MC7細胞を5マイクロモルのFluo-4 AM蛍光プローブ溶液で摂氏37度で45分間インキュベートします。細胞をPBSで3回洗浄した後、励起波長488ナノメートル、発光波長516ナノメートルの蛍光顕微鏡を用いて蛍光強度を測定します。サリドロシドは、Dcfh-DA免疫蛍光染色によって示されたROS蛍光シグナルを有意に増強しました。
一貫して、サリドロシドの介入はカルシウム産生を明らかに上昇させ、Fluo-4 AM免疫蛍光染色によって証明された。