まず、30ゲージの1ミリリットルのインスリン注射器を摂氏4度の冷蔵庫に入れて冷却します。血管細胞を含む新しく調製したマトリックスゲルミックスを、マウスが注射の準備が整うまで氷上に保管してください。次に、適切に麻酔をかけたマウスを手術台にうつ伏せの位置に置き、テープを使用して手足を手術台に固定します。
予冷したインスリンシリンジに300マイクロリットルのマトリックスゲル混合物をロードし、気泡の形成を防ぎます。75%アルコールパッドを使用してマウスの背面の皮膚を消毒し、シリンジ内のマトリックスゲル混合物300マイクロリットルを動物の背中の片側に皮下注射します。.注射部位から針をそっと取り外して、ゲル混合物の漏れを防ぎます。
注射部位に小さなこぶが形成されていることを確認します。マウスを加熱パッドの上に2分間置いて、マトリックスゲル混合物が凝固してプラグを形成するようにします。デモの手順を繰り返して、マウスの背面の反対側にプラグを作成します。
マーカーペンを使用してこぶの端に印を付けます。動物を20〜24度の特定の病原体のない実験動物実験室に収容し、12時間の光と12時間の暗のサイクルで7日間飼育します。