浸漬網を使用して水槽からオタマジャクシを捕獲し、0.005%ベンゾカインの50ミリリットル溶液に移します。刺激に反応しなくなるまで、溶液の中にとどまるようにします。スプーンを使ってオタマジャクシをそっと拾い上げ、背側を上に向けて湿らせたティッシュを入れた小さなペトリ皿に入れます。
次に、標本を実体顕微鏡の下に配置します。まず、鋭利なキャピラリーを取り、マイクロローダーチップを使用して10マイクロリットルの塩化コバルト溶液をロードします。その後、充填したキャピラリーをマイクロインジェクターハンドラーに入れてキャピラリーチップを切り離し、吐出量を約30ナノリットルに調整します。
マイクロインジェクターと実体顕微鏡を使用して、塩化コバルトで満たされたキャピラリーをレンズの上から目に挿入します。毛細血管の先端で眼球の内側に到達したら、片眼あたり約30ナノリットルの滴を2滴吐出します。右目を注射した後、ペトリ皿を180度の角度に回して左目を注射します。
注入したオタマジャクシを入れたシャーレを、飼育水1リットルの入った大きなタンクに移します。オタマジャクシが完全に目覚めるまで観察を続けます。10ミリモルの塩化コバルトを注射すると、錐体視細胞の特異的な細胞死が起こり、25ミリモルの注射では網膜の広域細胞死が起こりました。
免疫染色により、10ミリモルの塩化コバルトを注入した網膜には錐体がなく、桿体はほとんど保存されていることが明らかになった。25ミリモルの塩化コバルトを注射した後、光受容体と双極細胞の両方が深刻な影響を受けました。
