まず、安楽死させた新生児マウスの頭をしっかりと固定します。マイクロ手術ハサミを使用して、矢状縫合糸に沿って頭皮を開きます。次に、指で頭皮を両側に分離して固定します。
ハサミを使って頭蓋骨を切断し、前方にひっくり返して頭蓋骨にアクセスします。小さな骨膜エレベーターを使用して脳を抽出し、ハサミの先端を使用して脳をそっとこすり、頭蓋骨の基部を明らかにします。次に、頭蓋骨の基部にある両側側頭骨を調べます。
はさみを使用して、正中線に沿って頭蓋骨の基部を切開します。次に、皮膚をこすり落とし、不要な骨を取り除きます。側頭骨を保存し、新鮮なHBSSで満たされた35ミリメートルの滅菌ペトリ皿に移します。
次に、5つの数尖った鉗子のペアを使用して、側頭骨の錐体部分からボラと周囲の組織を取り除きます。鉗子を片手で持ち、側頭骨の半円形部分を安定させます。もう一方の手を使用して、鉗子の下端を丸い窓のニッチに挿入し、蝸牛の外側骨を前庭の鱗屑から分離します。
コルチ上皮器官に接触せずに側頭骨の錐体部分を慎重に除去します。次に、蝸牛の骨の迷路を基底から先端まで細心の注意を払って取り外して抽出します。5つの数尖った鉗子を使用して、コルチ器官の感覚上皮をモディオラスから慎重にマイクロ分離します。
次に、マイクロ手術鉗子を使用してらせん靭帯を保持し、線条血管から静かに分離します。200マイクロリットルのピペットを使用して、清潔な聴覚上皮をHBSSを含む3ミリメートルの滅菌培養皿に移します。単離された聴覚上皮をHBSSで満たされた100ミリメートルの滅菌ペトリ皿に入れ、その後の準備ステップのために。
