まず、tub-Gal4ハイブリッド系統のバージンバエとUAS-cac-RNAi系統のオスバエを採取します。処女と雄のハエを同じバイアルに移して子孫を収穫します。3〜5日間の閉塞後、ブラシを使用して子孫とtub-GL4 UAS-cac-RNAハエを収集します。
テストの前日に、ハエを餌と一緒に新しい清潔なバイアルに移します。次に、4〜6匹の二酸化炭素麻酔ハエを個々の新しいバイアルに注意深く入れます。ホワイトボードの前の三脚にカメラを置きます。
空のバイアルでカメラのフォーカスを手動で調整します。次に、バイアルを最高設定のハエで10秒間ボルテックスします。すぐにバイアルをホワイトボードに置き、ハエの発作のような行動を観察します。
回復時間は、ハエが直立する能力を取り戻すのに必要な時間として測定します。CACノックダウンバエは、野生型ハエよりも有意に高い発作様行動率を示した。ノックダウンしたハエの1秒以内の回復率は、野生型ハエよりも有意に低かった。