Transfection of TMEM200A siRNA in Stomach Adenocarcinoma Cell Lines

まず、TIMER2.0データベースのWebサイトインターフェイスに移動します。[Cancer Exploration] タブを選択します。検索ボックスに遺伝子IDを入力し、Submitをクリックすると、さまざまな腫瘍タイプのTMEM200Aの発現差画像が生成されます。

トランスフェクションでは、3本の微量遠心チューブをsiRNA-1、2、3と標識します。次に、トランスフェクション試薬を添加し、続いて基礎培地を各チューブに添加します。4マイクログラムのsiRNAをそれぞれのチューブに加え、完全に混合します。

次に、腺癌細胞を含む6ウェルプレートの3つのウェルに混合物を分配します。プレートを静かに振って、混合物が均一に分散するようにします。混合物を添加した 3 つのウェルに、siRNA 1、siRNA 2、siRNA 3 とラベル付けします。

細胞を4〜6時間インキュベートした後、標識ウェル内の培地の半分を新しい完全培地と交換します。細胞を24〜48時間インキュベートしてから、定量的RTPCRおよびウェスタンブロッティングに使用します。