Arteriovenous Blood Sampling Technique in Mice Using Sulzer's Vein and Left Ventricle for Metabolomic Analysis

まず、麻酔送達用のノーズコーンを備えた解剖トレイにマウスを置きます。前足の引っ込みなどの動物の反射を確認して、麻酔が適切な深さに達していることを確認します。次に、マウスを配置して背側の皮膚を露出させます。

毛の剥離を防ぐために、たっぷりの70%エタノールで肌を湿らせます。胸郭の下部から背中に沿って切開し、首まで伸ばします。先端を曲げた鉗子を使用して、肩甲骨間褐色脂肪組織をそっと持ち上げ、付着した組織を慎重に切断します。

脂肪パッドを頭に向かって持ち上げ、付着した組織を切断して、スルザーの静脈が露出するまで慎重に領域を開きます。次に、スルザーの静脈を慎重に切断します。ボトムカット200マイクロリットルのピペットチップとP100ピペットを使用して、約40マイクロリットルの血液を採取し、採取した血液を採血管に保管します。

血清採取プロセスまでチューブを氷上に保管してください。腹側皮膚を70%エタノールでたっぷりと湿らせて、脱毛を防ぎます。ハサミを使用して、胸腔を慎重に開き、心臓を露出させます。

29ゲージの半インチの針を備えた1ミリリットルの注射器を使用して、左心室の頂点領域を正確に穿刺します。針の3分の2を心臓の頂点の右水平に約3〜5ミリメートル挿入し、注射器を後ろに引いて左心室から血液を採取します。次に、血液サンプルを 10 、 000G で 4 °C で 10 分間遠心分離します。

ピペットを使用して上清を採取し、代謝物の抽出と分析を進めます。