まず、安楽死させたマウスを裏返して、腹側が上を向くようにし、下顎骨に簡単にアクセスできるようにします。マウスの頭を親指と人差し指の間にそっと挟みます。かみそりの刃を使用して、下唇からネックラインに向かって、下顎の皮膚に矢状状の中央切開を行います。
切開中は、親指と人差し指を使って切った皮膚を開き、下の筋肉と顎骨を露出させます。次に、下顎の頬側の咬筋を切断します。下顎骨の内側に沿って筋舌骨筋を切断し、筋肉の付着を取り除きます。
下顎合成部をもう一度切開し、2つの半下顎骨を接続し、左右半分に分離します。下顎顆と側頭下顎関節の間にかみそりの刃をくさびで留めて、頭の残りの部分から下顎骨を慎重に解剖します。解剖した下顎骨を、あらかじめ温めた解剖培地を入れたペトリ皿に直ちに移します。
次に、明視野解剖顕微鏡の下で、15番の外科用ブレードを使用して筋肉組織を除去します。切歯ソケットを覆い、切歯の頂端部分を収容する下顎骨の楕円形の領域を特定します。内面または舌面が上を向くように下顎骨を配置します。
鋸歯状の鉗子で下顎骨を保持しながら、15番の外科用ブレードを使用して、顆から大臼歯に向かって上にある膜骨を削り取り、楕円形に窓を生成します。これにより、内面の頂端切歯の軟部組織が露出します。次に、下顎骨を回して、外面または頬面が上を向くようにします。
内側の下顎骨で示したように、外側の下顎骨の楕円形の領域に窓を生成します。一対の鉗子を使用して、端に残っている骨片を取り除き、歯の頂端が両側から見えるようにします。歯全体を分離するには、頂端切歯のすぐ隣の平面をきれいに切り込み、顆突起を取り除きます。
次に、第3大臼歯のすぐ後ろに、しかし歯を傷つけることなく切歯の背側に2番目の切り込みを入れて、冠状突起を取り除きます。角突起の先端から切歯に向かって連続的に切断し、腹側下顎骨を徐々に除去します。次に、大臼歯で歯槽骨と切歯に付着したままの残りの骨を切り取ります。
完全に解剖した切歯を温かい解剖培地の入った皿に移します。蛍光顕微鏡をオンにし、組織からの蛍光信号を使用して歯周組織の除去をガイドします。内切歯を舌側に置き、鋸歯状の鉗子を使用して歯を所定の位置に保持します。
次に、5番の細かい鉗子を使用して、歯周組織を引っ張り始め、頂端切歯と子宮頸管ループ領域を覆います。頂芽から歯周組織を慎重に剥がし、子宮頸管の外側が見えるようにします。
