まず、麻酔をかけられた生後8週齢の雌マウスの背中の毛を剃ります。ヨードホルムとアルコールを交互に浴びて皮膚を3回消毒します。次に、メスを使用して、背側の皮膚に長さ2.5センチの内側切開を行います。
背骨が見えるまで筋肉を切開します。綿で血を軽くたたきます。ピンセットで、T9からT11のレベルで脊椎を露出させます。
脊椎固定具を使用して、T10ファセットを両側に固定し、脊椎の安定した固定を保証します。次に、マイクログラインドグリルを使用して傍脊椎筋を剥がします。次に、棘突起とラミネートを取り外して、T10セグメントで脊髄を露出させます。
次に、インパクター機器の電源を入れ、デバイスが自動的に元の状態に戻るのを待ちます。麻酔マウスで脊椎固定具をgSmartSCIシステムに入れます。次に、ネジでしっかりと固定します。
操作タッチスクリーンを使用して、衝撃、速度、衝撃、深さ、滞留時間を設定します。プラットフォームを動かして、レーザー距離計を露出した脊髄の中心に合わせます。タッチスクリーンの[準備完了]ボタンをクリックします。
インパクトヘッドは設定パラメータに基づいて特定の高さに自動的に調整され、キャリアテーブルは脊髄インパクト部位をインパクトヘッドの下に移動します。インパクトヘッドを手動で押して、正確なインパクトサイトをさらに決定します。次に、[スタート]ボタンをクリックします。
これにより、インパクトヘッドが脊髄に当たります。マウスをデバイスから取り外し、20倍の倍率の実体顕微鏡の下に置いて、脊髄損傷を観察します。局所的なうっ血、虚脱、脊髄破裂などの損傷マーカーを探して、モデル開発の成功を確認します。
