ミクログリア単離のためのマウス脳解剖

まず、単離したマウスの脳組織を、1脳あたり1ミリリットルの消化バッファーに入れ、氷上の別々のペトリ皿に入れます。きれいなメスの刃を使用して、脳組織を細かく刻みます。先端がカットオフされたプラスチック製のトランスファーピペットを使用して、ミンチにした脳を氷上の24ウェルプレート内の個々のウェルに慎重に移します。

プレートを大きな透明で柔軟なフィルムで覆い、蓋を閉め、氷上で30分間インキュベートします。次に、消化した脳液を、5 ミリリットルの冷たい FACS バッファーを含む氷上の個々の 7 ミリリットルのアイスガラスウンスホモジナイザーに移します。単一細胞懸濁液が得られるまで、緩い乳棒で各脳を静かに叩きます。

15ミリリットルのポリプロピレンチューブに移す前に、タイトな乳棒で3〜4回静かに跳ね上げて、単一細胞懸濁液を確保します。