マウス脳強化免疫ペレットプレート染色法によるヒストン定量化

マウスの脳に富ませた免疫ペレットを15ミリリットルのチューブから丸底の96ウェルプレートに移します。プレートを500Gで5分間遠心分離した後、フリックして上澄みを取り除きます。細胞を100マイクロリットルのFACS緩衝液に再懸濁し、各ウェルから10マイクロリットルをコントロールウェルに移します。

500 Gで5分間遠心分離します。遠心分離した細胞から上清を除去した後、50マイクロリットルの二重濃度FCブロックを添加する。氷上で10分間インキュベートします。

次に、50マイクロリットルの抗体マスターミックスを最終的な所望濃度の2倍で添加し、暗所の氷上でインキュベートします。次に、200マイクロリットルのFACSバッファーを各ウェルに加え、500 Gで5分間遠心分離します。上清をフリックして廃棄し、300マイクロリットルのFACS緩衝液で細胞を洗浄します。

細胞を遠心分離し、200マイクロリットルのFACS緩衝液に再懸濁します。最後に、懸濁液を300マイクロリットルのFACS緩衝液が入ったフローソートチューブに移します。