シロイヌナズナ 成長チャンバーでの種子表面滅菌と栽培

まず、必要な量のシロイヌナズナ・タリアナ・コロンビア・ゼロ・シードを2ミリリットルのマイクロ遠心チューブに入れます。種子の表面殺菌のために、70%エタノールをチューブに2分間加え、チューブを静かに振る。エタノールを除去した後、種子を滅菌水で5分間洗浄します。

チューブから水を取り除き、残りの水を取り除く前に、重力によって種子をチューブの底に沈殿させます。種子水懸濁液を作成するには、種子を含むチューブに等量の滅菌水を加えます。幅広のピペットチップを使用して、播種グリッドに従って、ミディアムプレートの各領域に約30〜40個の種子を連続して均等に分配します。

種の中で水を30分間乾かします。プレートをマイクロポアテープで密封し、アルミホイルで包みます。暗闇の中で摂氏4度で3日間種子を重ねることで、種子の休眠を克服し、均一な発芽を促進します。

次に、プレートからホイルを開封し、層状種子の入ったプレートを白色光に1時間移して発芽を誘導します。光処理後、プレートをアルミホイルで包み、種子を光から保護します。プレートを成長チャンバーに垂直に置き、摂氏21度の暗闇で4日間培養します。