蛍光顕微鏡画像と電子顕微鏡の相関光・電子顕微鏡画像のレジストレーション

まず、登録ソフトウェアを開き、EasyCLIMv0を検索します。見つかったら、EasyCLIMv0をクリックし、ImageまたはSequenceをクリックし、Openを選択して、電子顕微鏡画像と明視野画像と蛍光画像の合成画像をインポートします。EasyCLIMv0インターフェースで、2D XYTをクリックして、非剛体2Dまたは3Dをアライメントモードとして選択します。

[EasyCLIMv0] ウィンドウで、変換およびサイズ変更される選択画像(おそらく FM)の右側にあるドロップダウンボックスをクリックして複合 RGB カラー tiff を選択し、次に変更されない選択画像の右側にあるドロップダウンボックス(おそらく EM)をクリックして、6 つの画像 tiff を選択します。「開始」をクリックして、登録プロセスを開始します。電子顕微鏡画像ウィンドウ6画像tiffで、金ナノ粒子をクリックして0.1を配置します。

蛍光顕微鏡画像ウィンドウで、RGBカラーtiffを合成します。対応する金ナノ粒子をクリックして、その上に0.1を置きます。次に、Update Transformationをクリックして、金ナノ粒子の蛍光信号と電子顕微鏡信号のアライメントを確認し、Stopをクリックして登録を完了します。

4 つのチャンネル画像を含む位置合わせされた画像スタックを書き出すには、オーバーレイされた画像をクリックし、「画像」または「シーケンス」を選択して、「名前を付けて保存」をクリックします。ImageJ を開き、「ファイル」をクリックして「開く」を選択し、オーバーレイ画像をインポートします。[画像] に移動し、[スタック] をクリックしてから、2 つの画像をスタックして 4 つのチャネル画像に分割します。その後、[画像]を選択して[色]をクリックし、[チャンネルをマージ]をクリックして、3つのチャンネルを合成画像にマージします。

合成画像を光学顕微鏡と電子顕微鏡の相関画像に変換するには、「画像」を選択し、「タイプ」を選択して、「RGB カラー」をクリックします。