まず、pHluorinを発現するトリパノソーマ・ブルーセイ細胞を採取します。テトラサイクリンまたはドキシサイクリンを添加し、一晩インキュベートしてpHluorin発現を誘導します。次に、各培養液の3ミリリットルを別々の15ミリリットルのチューブに移します。
次に、細胞を室温で1000 xgで10分間遠心分離します。上清を除去し、細胞を1ミリリットルのPBSに再懸濁します。細胞を4回目に遠心分離した後、上清を除去し、細胞ペレットをさまざまな濃度のグルコースを含むPBSに再懸濁します。
ヨウ化プロピジウムまたはチアゾールレッドのいずれかを添加して、死細胞と生細胞を区別します。次に、各サンプルをフローサイトメーターと互換性のある5ミリリットルのチューブに移します。