まず、4〜6日齢の麻酔をかけた子豚を背側横臥位に置きます。カフチューブを使用して口腔気管挿管を行った後、肺基部を聴診して適切な気管内チューブの配置を確認します。人工呼吸器を設置し、手術中の麻酔の深さを心拍数、血圧、酸素飽和度を通じて継続的に監視します。
必要に応じて、換気と鎮静のパラメータを調整します。次に、大腿動脈に3フレンチカテーテルを挿入し、続いて静脈に4フレンチカテーテルを挿入します。次に、動物と機械との間に十分な距離を維持しながら、CPBチューブを短くしてセットアップされた心肺バイパス(CPB)回路を開始します。
膜型人工肺の流出とポンプの流入を接続するチューブブリッジを作成します。すべての接続ポイントが密閉されたら、300マイクロリットルのヘパリン生理食塩水と300ミリリットルの新鮮なドナー豚の血液で回路をスイープし、続いて重炭酸ナトリウム、ヘパリン、グルコン酸カルシウムをスイープします。CPB回路の準備ができたら、左内頸静脈を露出させ、針カテーテルを挿入します。
同様に、カニューレ挿入の準備をするために右頸動脈を露出させます。血の閃光が見えたら、ガイドワイヤーを血管に慎重に挿入します。ダイレーターをワイヤーに通して容器に通します。
次に、拡張器を取り外します。8フレンチ静脈カニューレを約4センチメートルゆっくりと血管に通し、ワイヤーを取り外して、カニューレが所定の位置に留まることを確認します。次に、6 フランスの小児用動脈カニューレを、以前に拡張で示したように右頸動脈に留置します。
最後に、新しく配置された動脈カニューレを通して静脈内ヘパリンボーラスを投与します。アクセスを達成した後、3-0吸収性縫合糸を使用して両方のカニューレを動物に固定し、テープを使用して不注意な取り外しを防ぎます。カニューレをCPB回路に接続し、ヘパリン生理食塩水が接続ポイントに追加されて、回路内の空気を防ぎます。
初期流量を 80 から 85 ミリリットル/キログラム/分に設定します。心停止を誘発するには、9ミリ当量の塩化カリウムを投与します。.心臓が止まったら、動物を回路から隔離します。
次に、CPB回路の流れを維持して、1, 500 RPMで循環します。適切な心停止状態を達成した後、子豚をCPB回路に再接続することにより、体外心肺蘇生を開始します。末 ?? 動脈アクセスを通じて3ミリリットルのグルコン酸カルシウムと6ミリリットルの重炭酸ナトリウムを投与し、必要に応じて用量を追加します。.
血管カニューレ挿入と心停止を伴うCPBは、実験で92%の成功率を達成しました。MRIは、対照群と比較して、心停止動物を用いたCPBにおける早期脳損傷の明確な徴候を示した。急性拡散テンソルイメージングモダリティは、他の従来のMRIシーケンスよりも梗塞の兆候をより明確に特定しました。