まず、麻酔して挿管したマウスを右の側褥位に置きます。両方の前足を左上隅に、後足を左下隅に持っていきます。切開前に左胸部を70%アルコールで消毒します。
第4肋間腔の皮膚を切開して開いた後、ハンドヘルド焼灼ペンを使用して、皮下層と筋肉層内の目に見える血管を凝固させます。はさみで、広背筋と前鋸筋を皮膚切開の長さに沿って分割します。一対の細かい湾曲した鉗子で4番目の肋骨を慎重に持ち上げます。
5本目の肋骨のすぐ上にピンポイントで切り込みを入れ、4本目の肋間腔に入ります。陰性胸膜腔圧が失われ、肺が胸壁から後退した場合は、開胸術を第4肋間腔の前方および後方に延長します。2つのリブリトラクターを適用してリブスペースを広げ、少なくとも1平方センチメートルの作業ウィンドウを視覚化できるようにします。
2つの先のとがった綿の浸漬アプリケーターを使用して、頭蓋を持ち上げ、左肺を動員します。次に、半透明の下肺靭帯を率直に分割します。肺を前方に反射させて、左肺の後部肺門を視覚化します。
次に、6-0シルクネクタイの約10センチメートルを切り取り、ネクタイの中点をヒルムの後方に配置します。次に、左肺をネクタイの上で後方に反転させ、タイの両端を前方に引っ張ります。利き手で湾曲した蚊クランプを持ち、もう一方の手で一対の鉗子を持ちます。
タイの一方の自由端Aを鉗子で保持し、閉じたクランプにその中点を一度ループします。次に、もう一方の自由端Bの中点をクランプでつかみ、両手で引っ張ってスリップノットを締めます。結び目を結んだ後、Bは結び目からループを持ち、Aはまっすぐである必要があります。
気管支の適切な閉塞を確認するには、気管内チューブから人工呼吸器への流出チューブを手動で閉塞します。これにより、左肺が膨張することはありません。次に、6-0ナイロン縫合糸で作られた1つまたは2つの単純な中断ステッチで皮膚切開を閉じます。
必要な虚血期間が経過したら、ネクタイのB端をそっと引っ張ってスリップノットを外します。すぐに再灌流筋を開始し、気管内チューブの出口チューブを人工呼吸器に閉塞して肺を再膨張させます。再灌流中は、シングルステッチの6-0ナイロン縫合糸で4番目の肋骨のスペースを閉じます。
再灌流時間が終了する15〜20分前にマウスを仰臥位に置きます。四肢すべてをテープで固定します。正中線開腹術を行った後、最も下肋骨のカーブに沿って腋窩線まで開腹術を左右に伸ばします。
腹部から、前横隔膜を切開して胸部に入ります。次に、切開部を前腋窩線の左右に、最も下側の肋骨に沿って伸ばします。両側の肋骨を前腋窩線に沿って分割します。
上向きに伸ばして、クラムシェル開胸術を作成します。次に、胸壁の前壁を上に反射して、心臓と両側の肺を露出させます。次に、胸部の前壁にクランプを取り付けて、引っ込みを容易にします。
正中線に湾曲した蚊クランプを使用して、横隔膜を下方向に引っ込め、胸の視認性を高めます。次に、正中線を越えて伸びている小葉を左胸に戻して、右胸に戻します。綿の先端のアプリケーターとハサミの助けを借りて、葉を左胸部に接続する細い靭帯を分割し、肺全体を前方に反射させます。
次に、別の6-0シルクタイを右のヒルムの後方に置きます。右肺の4つの葉すべてが取り囲まれていることを確認しながら、右肺門の周りにスリップノットを結びます。次に、1ccのツベルクリン注射器に半インチの31ゲージの針に200マイクロリットルのヘパリンをコーティングします。
右肺門クランプの4分後、左心室から動脈血をシリンジに引き込みます。針を左首に向けて角度を付けます。ABG 評価に十分な血液を得るためには、複数回の穿刺が必要になる場合があります。
左肺門クランプにより、偽開胸術と比較して左肺の酸素分圧が大幅に低下しました。ABG評価では、好中球のほとんどが左肺の肺門クランプ後に血管内であることが示されました。
