プロテインGゲルによるトランスフェクションHEK293タンパク質のプレクリアとエピトープタグアフィニティーゲルを用いたタンパク質複合体の捕捉(英語)

まず、40マイクロリットルの1対1のプロテインGゲルスラリーをタンパク質サンプルを含むチューブに加えます。回転子上でサンプルを4°Cで約30秒周期で1時間回転させます。次に、サンプルを12, 000 Gで摂氏4度で20秒間遠心分離します。

チューブを氷の上に1分間置き、ビーズを水平にします。上清を収集し、低タンパク質吸収の新しい1.5ミリリットルチューブに移します。別の1.5ミリリットルチューブに入力するためにアリコートを取り外します。

濃縮サンプルバッファーを4倍加えて均等に希釈し、摂氏98度で10分間加熱します。次に、20〜30マイクロリットルの1対1のエピトープタグスラリーをサンプルに加えます。回転子上でサンプルを4°Cで約30秒周期で2時間回転させます。