腫瘍同定のための根治的前立腺全摘除術、前立腺染色、およびサンプル特性評価

まず、マルチまたはバイパラメトリックMRIを使用して、手術前に腫瘍とその前立腺の位置を特定します。次に、腹部へのアクセス、気腹、およびケモポートの配置で患者を準備します。気腹を12ミリメートルに設定します。

腹膜を切開して膀胱を解放し、直腸周囲腔を解剖します。次に、両側の骨盤筋膜を開き、前立腺と膀胱の前面と外側の側面を完全に解剖します。膀胱頸部を開き、近位尿道を特定します。

近位尿道を切片にして、前立腺と膀胱の後面にアクセスします。次に、精嚢と直腸腔を解剖し、続いて前立腺の外側の側面を解剖します。頂点を解剖します。

次に、遠位尿道を切片にします。次に、膀胱尿道吻合を完了します。前立腺を摘出し、切開部を縫合して閉じます。

採取したばかりの前立腺を乾いた容器に入れます。サンプル採取のために前立腺を処理するには、まずMRI情報に基づいてターゲットゾーンを選択します。使い捨ての自動針で、選択した領域から円筒形のサンプルを取り出します。

次に、シリンダーの外側のゾーンを特定し、一対の組織鉗子で固定します。シリンダーをスライドに置き、外側のゾーンにティッシュインクで印を付けます。収集したシリンダーをクライオスタット埋め込み媒体で満たされたサンプルホルダーディスク上に水平に置き、ミクロトーム冷却プレートに移して切断します。

次に、サンプルホルダーディスクを試料チャックに取り付けます。OCTコンパウンドを使用して、切片化前に組織サンプルを埋め込みます。クライオスタットミクロトームを使用して、サンプルを摂氏25度で切断します。

処理した顕微鏡スライド上に細い円筒形の組織切片を集めます。スライドを96%エタノールで固定し、蒸留水で水和します。ハリスヘマトキシリンの切片を1分間染色します。

次に、スライドを30%水酸化アンモニウムで処理して、ヘマトキシリンを青に変えます。次に、洗浄したスライドをエオシンで30秒間染色します。次に、アルコールの滴定を増やしてスライドを脱水し、続いて100%キシレンで透明にします。

GPXでスライドをマウントし、染色した組織にカバースリップを置きます。光学顕微鏡を使用して染色されたサンプルを分析し、がん腫のある領域を識別し、腫瘍のグリーソンスコアを決定します。スライド上に正確な腫瘍ゾーンをマークします。

次に、外科用ブレードを使用して、OCTディスク内のスライドにマークされたサンプル領域をマクロミクロに解剖します。包埋組織が解凍を開始したら、一対の鉗子で組織を持ち上げ、正しく標識されたクライオチューブに入れます。この手法は、研究された症例の61%から腫瘍材料を得るために使用されました。

腫瘍の獲得が失敗した16の前立腺のうち、10の腫瘍負荷が10%未満で、20%を超えるものはありませんでしたROC曲線分析は0.843の曲線下面積を示し、この方法が満足のいく腫瘍獲得結果を提供できることを示しています。根治的前立腺全摘除術標本と処理されたシリンダー生検の組織病理学的相関は、ヘマトキシリンおよびエオシン染色を使用して実施されました。円柱に沿って、がん細胞が並ぶ小さな整形腺を示すグリーソンパターン3など、さまざまな組織学的パターンが見つかりました。

非定型細胞が拡大した不規則な形状の腺がグリーソンパターン4セクションで観察されました。前立腺上皮内腫瘍のサンプルは、管腔内に密集した細胞を示しました。