レーザー誘起衝撃波曝露がマウスの蝸牛機能および聴覚閾値に及ぼす影響の評価

まず、レーザー誘起衝撃波、またはLISW露光アセンブリを準備します。露光アセンブリに532ナノメートルのQスイッチNDYAGレーザーを照射して、ターゲットの背後にLISWを生成します。平凸レンズを通してレーザーパルスをレーザーターゲットの直径3mmのスポットに集束させます。

LISW照射により、2つの材料の接合面にプラズマを発生させ、ゴムを気化させて気化させたゴムを空洞内に残します。麻酔をかけたマウスの耳介後領域を慎重に剃り、毛皮に閉じ込められた空気が保持されないようにします。マウスをプレートに固定し、耳介後領域をLISW焦点領域に向けて上向きに配置させます。

音響インピーダンスのマッチングを確保するには、レーザーターゲットと皮膚表面の間に超音波導電性ゲルを使用します。マウスの耳の耳介後領域に経皮的に黒いゴム製のターゲットを取り付けます。1 つの LISW パルスを側頭骨を介して 3 つのエネルギー密度で蝸牛に適用します。

尾の尾部の下に接地電極を挿入します。次に、耳道と耳の前部に脳波記録用のステンレス鋼針電極を挿入します。小さなイヤホンで刺激音を呈示し、マウスの鼓膜付近の音圧レベルを測定します。

サウンドジェネレーターから37サイクルで出力バースト刺激を生成し、音圧を20デシベルの音圧レベルから80デシベルSPLまで5デシベルSPLステップで増幅します。聴覚脳幹の反応、またはABRピーク1振幅を測定して、蝸牛の機能を評価します。次に、ABRピーク解析ソフトウェアが、聴力閾値とABR P1振幅に対してABR波形を自動的に解析します。

LISW曝露後のABRを用いた聴覚機能評価では、ABRの閾値が1日で有意に変化し、より高いエネルギーレベルで1ヶ月間持続することが明らかになった。2ジュール/平方センチメートル群のABR閾値は、曝露前のレベルまで回復し、エネルギー依存的な影響を示している。LISW曝露の1日と1か月後、周波数を超えてすべてのLISW照射群でABR P1振幅の有意な減少が観察されました。