レーザー誘起衝撃波曝露がマウスの蝸牛組織学と細胞生存に及ぼす影響

LISWばく露の1ヶ月後、マウスの蝸牛の病理学的検査を行う。授乳中のリンゲル液で血液灌流を開始し、続いて4%パラホルムアルデヒドによる経心臓灌流を開始します。マウスの斬首後、蝸牛を取り外し、摂氏4度で4%パラホルムアルデヒドを直接一晩灌流します。

蝸牛の全体像を取得した後、ImageJ ソフトウェアを使用して蝸牛周波数マップを計算し、異なる周波数で特定の蝸牛領域を正確に位置特定します。与えられた式を使用して、各周波数での有毛細胞の生存率を計算します。内有毛細胞の高解像度Zスタック画像を取得した後、シナプスの数を計算します。

ヘマトキシリンとエオシンで染色された蝸牛切片を視覚化し、ローゼンタール管の中央回転における螺旋神経節ニューロンの数を数えて、コントロールごとの螺旋神経節ニューロンの生存率を計算します。対照群と比較して、蛍光免疫染色は無傷の蝸牛構造を示し、すべての群で有毛細胞や神経線維の有意な損失は見られませんでした。しかし、定量的評価では、外有毛細胞の生存率は2.5ジュール/平方センチメートルのグループで有意に低いことが示されました。

一方、内有毛細胞の生存率はグループ間で一貫していました。シナプスリボンの数は、高周波数グループで著しく減少しました。これは、2.5ジュール/平方センチメートルのグループでのらせん状神経節ニューロン密度の減少と並行しており、蝸牛変性症がLISWエネルギー曝露に依存していることを示しています。