マウスの腫瘍解析のための統合イメージング技術

窓室手術から少なくとも3〜4日後、麻酔をかけたマウスをガス麻酔アタッチメントでイメージングステージに固定します。明視野顕微鏡を使用して、DSFCのフロントフレーム上の基準マーカーのディボットの視認性を確保し、広視野画像を取得します。同日、生体内顕微鏡モダリティを使用して微小血管画像を撮影します。

マウスをMRIベッドに置いた後、マイクロチューブを取り付けた27ゲージのバタフライ針を尾静脈に挿入します。3Dプリントされた固定装置で窓室を固定する 18ゲージの針を使用して、MRI基準マーカーの7本のチューブに獣医用眼潤滑剤を注入します。フィデューシャルマーカーをDSFCに貼り付けます。

ベッドを7テスラの前臨床MRIスキャナーに挿入します。集録するには、32 x 32 mm の視野と 64 x 64 のマトリクスを 0.5 x 0.5 mm のプレーン解像度に設定し、一貫した RF パルスを設定します。コロナルと軸方向の T2 重み付け画像セットを取得して、窓室平面を可視化します。

イメージングスライスを DSFC および基準マーカーに整列させるために、矢状 T2 重み付けセットを処方し、繰り返し向きを変えて、スライス 5 に DSFC に組織シグナルが含まれ、スライス 4 に組織シグナルが含まれないようにします。選択した動的造影MRI法を使用して微小血管イメージングを実行します。MATLAB ワークスペースで、微小血管、明視野顕微鏡、微小血管 MRI のデータを読み込み、[実行] ボタンをクリックします。

T2 重み付け MRI スライスを含むファイルに移動し、指標マーカーを表示する最大 4 つのスライスを選択します。MRI画像内の7つの基準マーカーのそれぞれに点を配置し、顕微鏡画像上の対応する点と一致させます。svOCT微小血管画像上の少なくとも3つの微小血管ランドマークポイントと顕微鏡画像内の対応するポイントを選択します。

共登録顕微鏡画像で腫瘍を輪郭を描くと、svOCT 微小血管データセット、共登録顕微鏡画像、および共登録 MRI パラメーター マップが表示されます。後で解析するためにマップを保存します。健康なマウスと担がんマウスの両方で微小血管イメージング、広視野顕微鏡、およびMRIを同時レジストレーションすることで、微小血管と大血管の指標の相関分析が可能になります。

動的造影MRI大血管メトリクスは、svOCT由来の微小血管メトリクス間に強い相関関係を示し、両方のプロットのR二乗値で示されました。相関関係は、主に異なる微小血管構造にわたって血管特性を測定する動的造影MRIの能力を評価するために、健康なマウスと担腫瘍マウスの両方で測定されました。