活性化マウスCD8+ T細胞遊走ダイナミクスを研究するためのタイムラプスイメージング

まず、マウスの二次リンパ組織から生きたリンパ球を単離し、4倍または10倍の対物レンズを備えた光学顕微鏡で細胞を視覚化します。1ミリリットルのピペットを使用して、活性化された細胞を破壊し、それらを新しい15ミリリットルの円錐管に移します。細胞を皮むき、リンパ球分離培地を追加して、生きた細胞を死んだ細胞から分離します。

タイムラプス顕微鏡では、37°Cのチャンバー内で、CD8+T細胞を10倍から5番目のCD8+T細胞に1回ずつプレートします。インテグリンブロッキングを行った後、10〜60秒ごとに明視野および蛍光画像を10〜60分間取得します。タイムラプスイメージングでは、活性化されたCD8+T細胞は、ナイーブ細胞と比較して平均速度、変位、および蛇行指数が増加していました。